本试剂盒用于血清或血浆中血管紧张素转换酶(ACE)的体外定量测定。
检测原理: FAP在波长340nm处有最大吸收峰,应用血管紧张素转换酶酶解N-(3[2-Furyl]Acryloy)-phe-gly-gly变成FAP及GG,从而发生吸光度上的下降变化。可在特定波长处测定吸光度的变化速率而计算出样本中血管紧张素转换酶的活力。高度溶血可导致正的误差。参考值5~52U/L(此数据仅供参考,建议各实验室建立自己的参考值范围)。
背景资料: 血管紧张素转换酶(ACE)的主要功能是转化血管紧张素Ι为血管紧张素II,后者有升高血压的作用,大多数结节病活动期ACE活性升高。血清ACE主要来源于肺毛细血管内皮细胞,急性肺损伤时ACE可发生显著变化,血清ACE变化可作为衡量各种因素所致肺损害程度的重要指标。
产品组成: 储存条件:2~8℃,有效期一年。
样本要求: 不溶血的血清或血浆,血浆只能用肝素抗凝,不可使用EDTA抗凝。
性能指标: 试剂空白吸光度:A340nm(1cm光径)≥0.8
试剂空白吸光度变化率:ΔA/min(1cm光径)≤0.004
线性范围:0~300U/L(判定依据:r
2≥0.990)
准确度:测定均值在该批质控品规定的偏差范围内
精密度:批内CV≤6.0%;批间相对极差≤10.0%
灵敏度:试剂检测下限≤5.1U/L
注意事项:1.如仪器内无本试剂盒所要求波长的滤光片,选择波长接近的滤片。
2.样品与试剂比例可根据需要按比例调节。
3.不同批次的试剂不推荐混合使用。
4.胆红素对ACE有显著抑制作用,重度黄疸血清可使测定结果显著偏低。
参考值范围: 12~60U/L(此数据仅供参考,实验室应建立自己的参考值范围)
检验方法的局限性: 高度溶血可能导致较大误差。
检测方法: 一、生化分析仪测定方法 1.
试剂配制:本试剂为液体,可直接使用。
2.
测定条件| 主波长 | 340nm |
| 试剂量 | 250μL |
| 标本 | 25μL |
| 反应温度 | 37℃ |
| 反应方法 | 速率法 |
| 反应方向 | 向下 |
3.
自动生化分析仪使用操作方法| 成分 | 空白 | 测定 |
| 工作试剂 | 250μL | 250μL |
| 蒸馏水 | 25μL | - |
| 标本 | - | 25μL |
| 混匀,37℃孵育90秒,以空白校零,连续监测90秒吸光度变化,计算ΔA/min |
4.
计算结果a.用校准品定标
| ACE活力(U/L)= | ΔA/min样本-ΔA/min空白 | ×C标准 |
| ΔA/min标准-ΔA/min空白 |
b.用计算因子进行计算
ACE活力(U/L)=(ΔA测定/min-ΔA空白/min)×F(9322)
| F= | 反应总体积(mL)×1000 |
| 样本体积(mL)×毫摩尔消光系数×1.0 |
注:
1000=U/mL到U/L的转换系数
1.0=比色皿光径
FAPGG在340nm处的毫摩尔消光系数=1.18
二、分光光度计测定方法1.
操作步骤| 成分 | 空白管 | 测定管 |
| 工作试剂 | 1mL | 1mL |
| 蒸馏水 | 100μL | - |
| 样本 | - | 100μL |
| 混匀,37℃孵育90秒,以空白管校零,0.5cm光径石英比色皿,340nm波长连续监测90秒吸光度变化,计算ΔA/min |
2.
计算结果a.用校准品定标
| ACE活力(U/L)= | ΔA/min样本-ΔA/min空白 | ×C标准 |
| ΔA/min标准-ΔA/min空白 |
b.用计算因子进行计算:
ACE活力(U/L)=(ΔA测定/min-ΔA空白/min)×F(9322)
| F= | 反应总体积(mL)×1000 |
| 样本体积(mL)×毫摩尔消光系数×1.0 |
注:
1000=U/mL到U/L的转换系数
1.0=比色皿光径
FAPGG在340nm处的毫摩尔消光系数=1.18