藻类RNA柱式提取试剂盒 产品官方链接

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百奥莱博
北京
2026-02-04 10:53

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号BTN120503
规格50次
产品说明
本产品是专门针对藻类RNA提取开发的高效RNA提取试剂盒。

产品特点:
1.操作更加简单快速,处理一个样品只需要约十分钟。
2.RNA纯度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数藻类中的多糖污染。
3.适用于常见的各种海水和淡水藻类的RNA提取。
4.得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
5.性价比高于进口的柱式藻类RNA提取产品。


产品组成:
组分规格
藻类RNA提取溶液A50mL
藻类RNA提取溶液B15mL
藻类RNA提取溶液C50mL
离心吸附柱50套
通用洗柱液50mL
RNA洗脱液10mL

保存:室温,其中溶液B需置于4℃保存,有效期一年。

注意事项:
溶液B为淡黄色液体,使用前请观察颜色是否正常。若溶液B有油粒状颗粒及分层,属正常现象,不影响使用。

使用方法:
1.估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100~200mg藻类(湿重)。
注意:海水藻类需要用纯净水洗涤2次以免藻类沉淀中残留的海水盐分干扰藻类RNA提取溶液A的作用。
2.液氮研磨破碎样品:取100~200mg离心得到的新鲜藻类细胞沉淀放入含液氮的研钵中,迅速将其研磨成粉末后,将粉末转移到标记的塑料离心管中,加入1mL藻类RNA提取溶液A,立即剧烈振荡20秒,充分混匀。
注意:藻类RNA提取溶液A在4℃放置后容易产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3.将液氮研磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中。
4.在离心管中加入0.3mL的藻类RNA提取溶液B和0.2mL自备氯仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状(颜色将根据提取的藻类不同而不同)。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有细胞破碎物。
6.将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
7.加入等体积的藻类RNA提取溶液C,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些含糖量高的藻类,属于正常现象),千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
8.先将一半的溶液(如果有沉淀,则将一半的悬浊液)转移到离心吸附柱中,13000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
9.将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,13000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10.加0.7mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可,但如果在第7步加入藻类RNA提取溶液C后有沉淀产生,则需要洗三次,每次加入的通用洗涤液的量改为0.4、0.3和0.3mL。
11.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12.将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入50~100μL RNA洗脱液,室温放置1~2分钟。
13.13000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14.RNA完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。如果电泳发现DNA污染严重建议减少起始样本的用量,已经纯化好的RNA可另购RNase-free DNase去除DNA污染。
15.RNA产量产率测定:将5~10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5~8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16.RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。