1．采用独特的消化技术，去除较大分子的DNA和rRNA，使miRNA更容易分离提取；
2．采用miRNA富集技术，使组织miRNA聚集起来，使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化，大幅提升miRNA的提取效率；
3．操作简便，只需30多分钟即可获得理想的miRNA提取结果。

1．请准备：无水乙醇、PH7.5 PBS溶液、1.5mL RNA-Free离心管、液氮、研钵。
2．取出洗涤液，按85%比例加入无水乙醇，1.5mL加入8.5mL无水乙醇，充分混匀。
3．组织处理：
4．加入0.22mL miRNA释放剂，充分振荡混匀，室温放置2分钟；
5．13000rpm离心5分钟，将400μL上清液转移到1支新的1.5mL RNA-Free离心管；
6．向上清中加入5μL miRNA富集剂，再加入300μL无水乙醇，充分混匀，静置2分钟；
7．将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，13000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
8．将吸附柱放回收集管内，加600μL洗涤液至吸附柱内，静置2分钟，13000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
9．按每份样本30μL取洗脱液（如10份提取样本，即取300μL洗脱液），放置于灭菌RNA-Free离心管，65℃预热。
10．将吸附柱放回收集管内，13000rpm离心2分钟，离去残留的乙醇。
11．取出吸附柱，放入新的1.5mL RNA-Free离心管，开盖放置2分钟，挥发乙醇。
12．加入30μL预热的洗脱液，静置2分钟，12000rpm离心1分钟，收集miRNA溶液。

1．裂解液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。
2．由于RNA容易降解，提取实验所用器具应除去RNA酶，实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子（一般50μL RNA溶液加入2μL。）
3．洗涤液加入乙醇后要充分混匀，最好现用现配，每次根据所要提取的样本量计算后适量配制。