pARE-luc是用于检测基于顺式作用元件antioxidant responseelement(ARE,抗氧化响应元件)的转录活性水平的报告基因质粒。pARE-luc是以pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了2个ARE结合位点,可以高灵敏度地检测顺式作用元件ARE的激活水平,可以用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态。
pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
主要信息:| Base pairs | 5622 |
| ARE response element(ARE RE) | 32-77 |
| luc2 reporter gene | 123-1775 |
| SV40 late poly(A)signal | 1810-2031 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2079-2497 |
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor)coding region | 2522-3316 |
| Synthetic poly(A)signal | 3341-3389 |
| Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region | 3456-3475 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3713 |
| Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region | 4504-5364 |
| Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site | 5469-5622 |
| Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region | 5571-5590 |
产品组成:| 组分 | 1μg | 100μg |
| pARE-luc报告基因质粒 | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
质粒图谱:
详细图谱:
酶切位点:1.pARE-luc中
没有的酶切位点包括:
| Sfi I | GGCCN,NNN`NGGCC | 9 | | EcoN I | CCTNN`N,NNAGG | 2997 |
| Bgl I | GCCN,NNN`NGGC | 9 | BsiC I | TT`CG,AA | 3392 |
| Acc65 I | G`GTAC,C | 15 | BstB I | TT`CG,AA | 3392 |
| Asp718 | G`GTAC,C | 15 | Sal I | G`TCGA,C | 3406 |
| Kpn I | G,GTAC`C | 19 | Afl III | A`CRYG,T | 3656 |
| Nhe I | G`CTAG,C | 21 | ApaL I | G`TGCA,C | 3970 |
| PaeR7 I | C`TCGA,G | 27 | HgiE II | ACCNNNNNNGGT -1/13 | 4235 |
| Xho I | C`TCGA,G | 27 | Not I | GC`GGCC,GC | 4476 |
| Bgl II | A`GATC,T | 79 | BstX I | CCAN,NNNN`NTGG | 4500 |
| Hind III | A`AGCT,T | 89 | BstE II | G`GTNAC,C | 4503 |
| BsrG I | T`GTAC,A | 614 | Ahd I | GACNN,N`NNGTC | 4578 |
| Dra III | CAC,NNN`GTG | 1270 | Bsu36 I | CC`TNA,GG | 4934 |
| Gsu I | CTGGAG 21/19 | 1503 | Pvu I | CG,AT`CG | 4948 |
| Bpm I | CTGGAG 22/20 | 1504 | Sac II | CC,GC`GG | 4972 |
| Apo I | R`AATT,Y | 1886 | Bst1107 I | GTA|TAC | 5088 |
| Mun I | C`AATT,G | 1950 | Xca I | GTA|TAC | 5088 |
| BamH I | G`GATC,C | 2043 | Spe I | A`CTAG,T | 5407 |
| Stu I | AGG|CCT | 2476 | BsmB I | CGTCTC 7/11 | 5420 |
2.pARE-luc中的
单酶切位点包括:
| Aat II | Afl II | Asc I | Ase I | Bsa I | BsaA I | BsiW I |
| BspM II | BssH II | Eco72 I | EcoR I | EcoR V | Mlu I | Nde I |
| Nru I | PflM I | Pme I | Pml I | Psp1406 I | PspA I | Rsr II |
| Sac I | Sma I | SnaB I | Spl I | Srf I | Tth111 I | Vsp I |
| Xcm I | Xma I |
测序引物: RVprimer3(5571-5590):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
使用方法:1.首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.pARE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(
YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(
YT273)。