RNA纯化即分离RNA产品与生成RNA所需的RNA酶等物质。RNA的纯化可采用TRIzol试剂盒法,其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质。苯酚的主要作用是裂解细胞,解聚核酸物质并使其释放,并且TRIzol试剂可以使有机相和无机相迅速分离,有机相中主要是酚和蛋白结合,从而使得蛋白和RNA脱离,RNA进入水相。
具体操作流程如下:1. 将细胞或组织置于试剂盒中(冰上操作),细胞得以裂解,对于整个组织器官宜采用研磨法。
2. 加氯仿于TRIzol试剂与样品混合液中,加以混合。
3. 离心上述样品,弃上清,以得到纯RNA。
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