本制品是对M-MuLV（RNase H-）进行基因工程改造，表达并纯化的高温逆转录酶，比M-MuLV（RNase H-）提高了热稳定性。该酶可以在高温条件下（50～60℃）进行cDNA第一链的合成，高温条件下有利于打开复杂RNA模板链。该酶最佳反应温度为50℃，具有热稳定相强，灵敏度高，特异性高，聚合能力强等优点。
产品组成：| 组份 | 10000U |
| BalbScript II Reverse Transcriptase(200U/μl) | 50μL |
| 5×BalbScript II RT Buffer | 1mL |
保存温度：-20℃
产品用途：1．1st Strand cDNA的合成；
2．cDNA Probe的制备；
3．RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
质量保证： 经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一目的条带。PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染，无RNA酶污染。
活性定义： 以Poly(rA)·Oligo（dT）为模板/引物，在50℃、10分钟条件下，掺入1nmol的[
3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位。
注意事项：1．用DEPC处理实验用到的所有实验器材，或者购买已经证明无核酸酶的实验用具，实验过程戴手套并经常更换手套，避免RNA酶的污染。
2．确保所用试剂及超纯水中无RNA酶污染。
3．试剂要严格密封保存。在反转录过程中，所有管子确保扣严。
4．纯化过的RNA必须保证不含有盐，金属离子，乙醇和苯酚，以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
5．为保证反转录反应的有效进行，需使用高质量的RNA模板。
6．最快可达2kb/min，需要提高反转录效率或模板含量较低时可以适当延长反转录时间。
使用方法： 一、第一链cDNA合成 试剂融化后，将试剂盒中各组分混匀并稍微离心后置于冰上。
1．按顺序加入以下反应物：
| 成分 | 用量 |
| 模板RNA | 总RNA | 0.1ng～5μg |
| poly(A) mRNA | 10pg |
| 特异性RNA | 0.01pg |
| 引物 | Oligo (dT)18 | 1μL |
| Random N6 | 1μL |
| 基因特异性引物 | 15～20pmol |
| 5×BalbScript II RT Buffer | 4μL |
| RNase Inhibitor(40U/μL) | 1μL |
| dNTPs(10mM) | 2μL |
| BalbScript II Reverse Transcriptase | 1μL |
| RNase-Free Water | 至20μL |
2．可选优化步骤：如果RNA模板GC含量高或含有二级结构，可先将模板与引物的混合液轻轻混匀，短暂离心，65℃孵育5min，冰上冷却。
3．轻轻混匀，离心。
4．如果使用Oligo(dT)
18或者基因特异型引物，50℃孵育15～30min。
使用随机六聚体引物时，25℃.先孵育5min，随后50℃孵育15～30min。
对于高GC含量或者具有复杂二级结构的RNA模板，使用60℃孵育15～30min。
5．70℃加热5min终止反应。
反应产物可直接用于PCR反应，如果不立即使用，-20℃保存少于一周的时间。长时间保存建议-70℃放置。
合成的第一链cDNA可直接用于PCR。
1．
常用反应体系（50μL）：| 成分 | 用量 |
| 2×Taq Master Mix* | 25μL |
| 上游引物 | 0.2～1.0μM（终浓度） |
| 下游引物 | 0.2～1.0μM（终浓度） |
| 模板 | 1～50ng（质粒）
10ng～1μg（基因组） |
| ddH2O | 至50μL |
*Mg
2+终浓度为2mM
2．
常用PCR循环：| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 94℃ | 90sec | 1 |
| 94℃ | 20sec | 30 |
| 57℃ | 20sec |
| 72℃ | 1kb/60sec |
| 72℃ | 5min | 1 |
| 4℃ | 保温 |
