钙黄绿素是一种钙依赖性荧光分子。主要需要在体内条件下研究骨代谢,并有助于在体外条件下对凹坑区域进行染色。钙黄绿素用于荧光测定钙和EDTA(乙二胺四乙酸)钙的滴定。细胞毒性很低,所以钙黄绿素常作为荧光探针去染活细胞。
基本信息:| 英文名称 | Bis[N,N?bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein |
| CAS号 | 1461-15-0 |
| 分子式 | C30H26N2O13 |
| 分子量 | 622.53 |
| 结构式 |  |
| 光谱特性 | Ex/Em=470nm/509nm |
| 熔点 | 200℃ |
| 外观 | 黄色至棕色固体 |
| 溶解性 | 微溶于水;1M NaOH (50mg/ml) |
| 干燥失重 | ≤10% |
用途描述: 科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。本品为络合指示剂、荧光指示剂。钙黄绿素被用于镁存在环境中钙荧光检测和EDTA滴定,也可以用来检测具有耐药性蛋白药物的相互作用。主要用于络合滴定钙,也可用于测定锶、钡、铜、锰、钴、镍、钼、铬等。Calcein另外在核酸扩增过程中会形成大量的焦磷酸根离子。荧光染料中的锰离子与钙黄绿素结合导致荧光淬灭,同时染料颜色为橙色。当扩增反应形成焦磷酸根离子时,锰离子与焦磷酸根离子结合形成焦磷酸锰,引起荧光信号的产生,同时染料颜色变为黄绿色。钙黄绿素目前已广泛应用于恒温扩增反应的荧光检测。
注意事项:1.如果钙黄绿素溶液很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如Pluronic F127。
2.或者您也可以用1/10浓度的Calcein-AM溶液代替培养基。
3.我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
4.部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
染色步骤:1.用DMSO制备1mM的钙黄绿素溶液,并用PBS将其稀释制成1~50μM的钙黄绿素溶液。
2.将1/10细胞培养基体积的钙黄绿素溶液加入到细胞培养基中。
3.在37℃培养细胞15~30分钟。
4.用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
5.用490nm激发波长,515nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。