人类嗜T淋巴细胞病毒前病毒PCR试剂盒 产品官方链接

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百奥莱博
北京
2026-02-04 10:53

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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570202610
北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号BTN13-27100
规格50次
产品说明
本产品基于PCR技术,采用人类嗜T淋巴细胞病毒前病毒特异性引物扩增,对扩增产物进行电泳检测。

背景资料:
人类嗜T淋巴细胞病毒(Human T-cell Lymphoma Virus,HTLV)是一种致瘤性RNA病毒,属慢病毒亚科,可分为Ⅰ型和Ⅱ型。近来发现该病毒在人类可引起多种疾病:Ⅰ型可引起成人T细胞白血病/淋巴瘤、热带痉挛性截瘫以及其他具有相关性的脊髓病等;Ⅱ型与T-多毛细胞/巨粒细胞白血病等疾病相关,两类病毒都会对人体健康造成严重损害,因此检测人类嗜T淋巴细胞病毒前病毒DNA具有重要意义。

产品特点:
1.即开即用,用户只需要提供病毒DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增人类嗜T淋巴细胞病毒(包括I型和II型)前病毒DNA,与其他病毒没有交叉反应。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。


产品组成:
组分规格
PCR MagicMix 3.01mL
超纯水1mL
HTLV前病毒通用PCR引物混合液100μL
HTLV前病毒通用PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)50μL
核酸释放剂20次(1mL)

保存:-20℃,有效期一年。
注:人类嗜T淋巴细胞病毒前病毒通用PCR阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

使用方法:

一、样品DNA的制备
1.用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20次核酸释放剂试用装。
2.如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在200μL水中加10μL人类嗜T淋巴细胞病毒PCR阳性对照的10000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用200μL水。提取结束后最后得到200μL模板DNA(每个样品)放冰上待用,溶解DNA沉淀的溶液不能少于200μL,否则PCR抑制物很可能会抑制PCR。


二、设置PCR反应(40μL体系)
3.对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成分N+2个样品管阴性对照阳性对照
PCR MagicMix 3.0各20μL20μL20μL
HTLV前病毒通用PCR引物混合液各2μL2μL2μL
N+2个样品DNA模板各18μL--
PCR阴性对照(水)-18μL-
HTLV前病毒通用PCR阳性对照(10000倍稀释液)--18μL

4.按下表设置PCR反应:
过程温度时间
预变性95℃5min
PCR反应
(35个循环)
95℃15sec
60℃60sec
72℃30sec
最后延伸72℃10min


三、电泳检测
5.取10~20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为237bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。