本产品就是根据猪圆环病毒2型保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量PCR产品。
背景资料： 猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属，为已知的最小的动物病毒之一。病毒粒子直径14～17nm，呈20面体对称结构，无囊膜，含有共价闭合的单股环状负链DNA，基因组大小约为1.76kb。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强。PCV2为致病性的病毒。猪对PCV2具有较强的易感性，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。
产品特点：1．即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2．引物经过精心优化，专一性强，只扩增猪圆环病毒2型，与其他病原没有交叉反应。
3．提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4．PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5．本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
产品组成：| 组分 | 规格 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 1mL |
| 超纯水 | 1mL |
| 猪圆环病毒2型PCR引物混合液 | 100μL |
| 猪圆环病毒2型PCR阳性对照(1×108拷贝/μL) | 50μL |
保存：-20℃，有效期一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
使用方法： 一、样品DNA的制备1．用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒DNA提取试剂盒，其使用手册可以从本公司网站搜索产品名称或产品编号BTN70701下载。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL猪圆环病毒2型PCR阳性对照的1000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应（40μL体系）3．对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2个
样品管 | PCR
阴性对照 | PCR
阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各20μL | 20μL | 20μL |
| 猪圆环病毒2型PCR引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | - | - |
| PCR阴性对照（水） | - | 18μL | - |
| 猪圆环病毒2型PCR阳性对照的1000倍稀释液 | - | - | 18μL |
4．按下表设置PCR反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5min |
PCR反应
（35个循环） | 95℃ | 30sec |
| 58℃ | 30sec |
| 72℃ | 20sec |
| 最后延伸 | 72℃ | 7min |
5．取10～20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有174bp大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
