Cas9X 医生手中的基因剪，更多研究者使用Cas9X发表自己的SCI文章。

【关注微信公众号“Cas9X细胞基因敲除”，专家在线免费为您设计方案】

Cas9-Stem Cell Service（SC）主要是针对难以进行基因编辑的“干细胞”为研究对象的服务，研究的干细胞包括：人间充质干细胞Human MSCs（脐带来源、脂肪来源、骨髓来源）、小鼠和大鼠间充质干细胞Mouse/Rat MSCs（脂肪来源、骨髓来源）、小鼠胚胎干细胞Mouse ESc。主要为研究者提供的服务包括：干细胞基因敲除、干细胞基因点突变和定点敲入的服务。Cas9基因编辑在干细胞应用方面的困难，主要是因为干细胞（除ES外）都非常难形成独立的克隆，同时干细胞转染效率极低，细胞可传代的代数有限等，这些问题导致了“干细胞”整体基因编辑的效率不高。

目前文献主要是用胚胎干细胞进行基因研究，其他干细胞使用Cas9的进行基因编辑效率都不高。但是随着干细胞的深入研究，基因和干细胞的“干性”和“成瘤性”之间的关系的研究需求非常明确，所以如何获得在干细胞上的高效基因编辑的方法是目前干细胞研究的一个热点技术。

具体影响到干细胞基因编辑的要素很多，例如干细胞的增殖活力、传代能力还有就是使用的培养基的差异等。

Cas9X针对不同类型的干细胞的特性，筛选增殖快而且具备良好的转染效率的干细胞株建立干细胞库，用于后续的基因编辑的研究。同时使用高效的办法来试实现基因编辑，包括使用高效的电转仪、小分子辅助DNA吸附到细胞表面、添加细胞因子来维持干细胞的干性和克隆形成能力等。Cas9X会针对每个具体的案例、每个具体的实验目的优化实验条件用来满足不同干细胞研究者的需求。目前提供的服务的干细胞类型包括：小鼠胚胎干细胞（Cas9X自有细胞系）、小鼠骨髓间充质干细胞（Cas9X自有细胞），人骨髓间充质干细胞（客户提供），其他细胞系实时更新，需要请联系。

技术原理图：


技术流程图：


参考文献：
1. Ran, F.A. et al. Genome engineering using the CRISPR-Cas9 system. Nat. Protoc. 8, 2281–2308 (2013).
2. Sojung Kim, D.K. Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins. Genome Res. 10.1101/gr.171322.113 (2014).
3. Quadros RM, Miura H, Harms DW, Akatsuka H, Sato T, Aida T, Redder R, Richardson GP, Inagaki Y, Sakai D, et al. Easi-CRISPR: a robust method for one-step generation of mice carrying conditional and insertion alleles using long ssDNA donors and CRISPR ribonucleoproteins. Genome Biol. 2017;18(1):92.
4. Kan Y, Ruis B, Takasugi T, Hendrickson EA. 2017. Mechanisms of precise genome editing using oligonucleotide donors. Genome Research 27, 1099–1111.


【关注微信公众号：“Cas9X细胞基因敲除”，专家在线免费为您提供优选方案】