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北京
2024-06-20 14:12

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号BY0006
规格1mL | 2mL | 5mL | 10mL | 25mL
产品说明
本产品为含有高纯度Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分的2×的即用型PCR预混液,适合大规模基因检测、快速克隆筛选、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测等。PCR产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于T载体克隆。本产品有含染料,在PCR反应完成后,PCR产物不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。PCR扩增产物不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

产品特点:
1.灵敏度高,扩增性能强,稳定性好。
2.操作简单:使用时只需加入DNA模板和引物,用水补足体系,可减少人工误差,缩短操作时间。本产品含有红色染料,PCR结束后不需添加上样缓冲液可直接上样电泳。
3.PCR产物的3’端含有一个突出的碱基A,纯化后可直接用于T载体克隆。
4.PCR产物经过纯化处理,可用于酶切、连接、荧光测序等实验。


产品组成:
组分1mL2mL5mL10mL25mL
2×PCR Mix(Red)1mL2×1mL5×1mL10×1mL5×5mL
DEPC水1mL2×1mL5×1mL10×1mL5×5mL

保存:-20℃避光,避免反复冻融,有效期1年。

使用方法:
1.建立反应体系
融解PCR反应所需的各种溶液,上下颠倒轻轻混匀后离心数秒。 按下表加入各成分配制20μL反应体系。
成分用量
DNA模板1μL
正向引物(10μM)0.4μL
反向引物(10μM)0.4μL
2×PCR Mix(Red)10μL
DEPC水至20μL

注:模板用量建议10~1000ng基因组DNA,1~30ng质粒,或1~2μL RT-PCR反应后的cDNA。
2.设置反应程序
过程温度时间循环数
预变性94℃2min1
变性94℃30s25~32
退火55~65℃10s
延伸72℃10s/kb
终延伸72℃5~10min1

注:以上举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。
3.结果检测
取2μL反应液,琼脂糖凝胶电泳观察结果。