免疫荧光染色试剂盒(山羊IgG,Cy3) 产品官方链接

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2024-06-20 14:12

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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产品属性
货号ZN1861
规格100T | 200T | 500T
产品说明
本试剂盒基于SABC系统,适用于一抗类型为山羊IgG的免疫荧光检测。SABC-Cy3将链霉亲和素-生物素引入荧光系统,能进一步提高敏感性及降低背景。Cy3比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3在554nm激化,在568~574nm发射荧光,呈鲜红色。

产品组成:
组分100T200T500T效价说明
正常兔血清1mL2mL5mL1:10用于组织切片的封闭
生物素标记兔抗山羊IgG100mL200μL500μL1:100生物素标记二抗
SABC-Cy3100mL200μL500μL1:100SABC-Cy3荧光染料
滴瓶3个稀释试剂用

保存:4℃,切勿冷冻,有效期一年。

自备试剂:
1.粘片剂APES(ZN1946)或POLY-L-LYSINE(ZN1945)。
2.EDTA修复液(ZN1951)。
3.0.02M PBS(pH7.2~7.6)配法(ZN2950):1000mL蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O 7g,NaH2PO4·2H2O 0.5g。


使用方法:
A.石蜡片热修复染色步骤:
1.石蜡切片,常规脱蜡至水。
2.根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3.热修复抗原:将切片浸入到EDTA修复液中,微波炉加热到沸腾后断电,间隔5~10min再修复1~2次,冷却。
4.滴加稀释的正常兔血清封闭液(稀释比1:10),室温20min,甩干,勿洗。
5.滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
6.滴加稀释的生物素标记兔抗山羊IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
7.滴加稀释的SABC-Cy3,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
8.水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
9.荧光显微镜观察。
B.石蜡片酶消化染色步骤:
将A程序的第4步:滴加酶消化液室温5~10min。酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。蒸馏水洗2min×3次。
C.石蜡切片酶不消化/修复程序:
对于不需要微波修复或消化的抗原,省略A程序中的第4步即可。
D.细胞片的染色步骤:
1.爬片。圆形盖破片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine),灭菌,备用。贴壁细胞消化后加入放有盖玻片的24孔板中培养1~2天,使细胞贴壁。悬浮细胞则处理后直接涂片,使细胞贴附。
2.固定。4℃预冷4%多聚甲醛固定20min或冷丙酮固定10min。蒸馏水洗2min×3次。
3.打孔。0.25% Triton X-100处理细胞15min。(若采用丙酮固定则此步骤可省略)
4.酶消化处理室温5~10min。酶消化可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)。蒸馏水洗2min×3次。
5.滴加稀释的正常兔血清封闭液(稀释比1:10),室温20min,甩干,勿洗。
6.滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
7.滴加稀释的生物素标记兔抗山羊IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
8.滴加稀释的SABC-Cy3,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
9.水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10.荧光显微镜观察。