本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3'羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3'羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5'-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3'羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1.DNA 3’末端标记：
a.参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10pmol of 3'-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10μL
[α-32P]-ddATP,~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50μCi)
TdT (20U/μl) ——————————————————2μL
补充无核酸酶的去离子水—————————————至50μL
b.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c.37℃孵育15分钟。
d.70℃孵育15分钟或加入5μL 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2.DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a.参考下表格设置反应体系：
DNA片段————————————————————1pmol of 3'-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4μL
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/μl)——————————————————1.5μL
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20μL
b.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c.37℃孵育15分钟。
d.70℃孵育15分钟或加入5μL 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3.其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。