DiI,DiO,DiD,DiR是一系列亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。这些环境敏感性荧光染料在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强。且具有消光系数高、极性依赖性、激发态寿命短等特点。一旦进入细胞膜后，可在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。
选购指南： 不同的荧光染色(DiI:橙色荧光;DiO:绿色荧光;DiD:红色荧光;DiR:深红色荧光)为活细胞多标、流式分析提供了便利：
1．DiO和DiI可分别用标准的FITC滤光片和TRITC滤光片检测。
2．DiD是DiI的衍生物，具有明显往红光迁移的激发和发射光谱，这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。
3．DiR具强效的近红外光穿透细胞或组织，并在近红外区具较低的自荧光水平，这些特性使其特适用于体内成像或示踪实验。
基本信息：| 同义名 | 1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide |
| CAS号 | N/A |
| 分子式 | C63H101IN2 |
| 分子量 | 1013.4 |
| 光谱特性 | Ex/Em=748nm/780nm |
| 推荐滤光器 | XF112-Omega,41009-Chroma |
| 溶解性 | 溶于DMSO，乙醇 |
| 结构 |  |
产品组成：| 组分 | 规格 |
| 细胞膜深红色荧光探针(DiR) | 25mg |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，干燥避光，有效期1年。
注意事项：1．荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3．DiR的发射波长肉眼不可见，因此需配备CCD镜头或其他的近红外检测仪器
4．本制品仅作科研用途！
使用方法：A．
染色液制备1．配置DMSO或EtOH储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5mM。
注：
① 未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。
② 发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。
2．工作液制备：用合适的缓冲液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)稀释储存液，配制浓度为1～5μM的工作液。
注：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。
B．
悬浮细胞染色1．加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2．37℃孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
3．孵育结束，按1000～1500rpm离心5min。
4．倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5．重复3和4步骤两次以上。
C．
贴壁细胞的染色1．将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2．从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
3．在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4．37℃孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
5．吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸干培养基。
D．
检测1．DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表。
| 产品名称 | 货号 | 分子量 | Ex/Em | 推荐滤光器 |
| DiO | SY0560 | 881.7 | 484/501nm | XF23-Omega,31001-Chroma |
| DiI | SY0494 | 933.87 | 550/567nm | XF32-Omega,31002-Chroma |
| DiD | SY0585 | 959.91 | 644/663nm | XF47-Omega,31023-Chroma |
| DiR | SY0584 | 1013.4 | 748/780nm | XF112-Omega,41009-Chroma |
2．多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a．DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b．DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c．DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
