分子生物实验中,对DNA PAGE凝胶中的结果鉴定和方法都力求高灵敏度和操作简便。相对于EB染色来说,银染法具有高灵敏度的同时,还可以克服EB可致癌性的缺点,同时避免了紫外观察对人体可能产生的伤害。
试剂盒组成:| 组分 | 规格 |
| 固定液(10×) | 100mL |
| 染色液粉剂 | 1.5g |
| 显影液A(10×) | 100mL |
| 显影液B | 150μL |
| 终止液(10×) | 100mL |
使用方法: 以10cm
2凝胶为例,不同凝胶的大小可按比例调整氧化液、染色液和脱色液的体积。所有浓缩液用前用ddH
2O稀释至1×后使用,摇床设置52rpm左右。
1.准备好放有ddH2O的塑料盒,将电泳的胶放入盒中在摇床上轻摇5min;
2.凝胶固定:倒掉盒中的水,以50mL/胶的量加入固定液,摇床上缓缓摇动30min;
3.洗胶:弃固定液,用双蒸水洗2次,每次30s;
4.凝胶染色:弃双蒸水,以50mL/胶的量加入染色工作液,避光摇20min;
5.快速洗胶:弃染色液,用双蒸水洗1次10s;
6.凝胶显影:以50mL/胶的量加入显影工作液,显色到能看到清晰的条带为止,建议时间3~5min左右;
7.终止:弃显影液,迅速加入终止液(50mL/胶),摇5min;
8.洗胶:弃终止液,用双蒸水洗2次每次1min。