本试剂盒适用于从各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳，请使用货号的试剂盒。
产品特点：1．使用方便，从组织中提取蛋白不需经过反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至30分钟～1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品组成：| 组分 | 50T | 100T |
| 组织线粒体试剂A | 10mL | 20mL |
| 组织线粒体试剂B | 10mL | 20mL |
| 试剂C | 10mL | 20mL |
| 试剂D | 10mL | 20mL |
| 蛋白酶抑制剂混合物 | 100μL | 200μL |
保存：线粒体试剂AB于2～8℃，长期存放于-20℃；试剂C和试剂D室温；蛋白酶抑制剂-20℃保存，有效期1年。
自备器材： 移液器、离心机、涡旋振荡器
注意事项：1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4．可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5．最好使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，用普通1mL玻璃匀浆器匀浆也可。也可采用超声破碎的方法，建议功率30w，10s。采用普通匀浆器或超声破碎，建议镜检，保证细胞80%以上的破碎率。
使用方法：1．提取液准备：每200μL试剂C和试剂D中各加入1μL蛋白酶抑制剂混合物混匀备用。
2．取50mg组织样本剪碎。
3．加入200μL冷的试剂A，置冰上10分钟。
4．Dounce匀浆器匀浆30～40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6．在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
7．取步骤6的上清于另一干净离心管中，加入200μL试剂C混匀，在4℃，11000×g以上条件下离心5分钟，取上清，即得胞浆蛋白。
8．在步骤6的沉淀中加入200μL冷的试剂B，混匀。
9．在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
10．弃上清。
11．在沉淀中加入80μL～150μL试剂D，置冰上20分钟，每隔5分钟高速涡旋振荡15秒。
12．即得线粒体蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注：
● 建议用BCA法进行蛋白定量。
● 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
