服务介绍

细胞稳定转染株构建

本公司构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选，最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418来代替新霉素进行选择性筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

我们有着多年构建稳转细胞株的经验，已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、HEK293、293T等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。

服务内容

1.载体构建：将外源基因构建到合适的载体上，如需病毒转染，则包装病毒；

2. 筛选浓度测定：以 10-14 天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度；

3. 细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到 60%-80% 覆盖；

4. 细胞转染：用构建好的载体（或包装好的病毒）转染目的细胞；

5. 抗生素筛选；

6. 鉴定筛选结果。

服务说明

1. 客户提供：待处理细胞株（如需公司提供请说明）；

2．构建质粒（可选，需另付费），合成siRNA等（可选，需另付费）；

3. 实验周期：1-2个月；

4. 若另有疑问欢迎向本公司咨询，我们将竭诚为您服务。

质量承诺

1. 稳定转染的细胞系；

2．权威的实验报告；

3. 详细的实验步骤；

4. 真实的原始实验数据。