慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效将目的基因(或RNAi)导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链RNA,其基因组进入细胞后,在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。整合后的DNA转录mRNA,回到细胞浆中,表达目的蛋白;或产生RNAi干扰。 慢病毒载体介导的基因表达或RNAi干扰作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。以上特性使慢病毒载体与其它病毒载体相比,比如不整合的腺病毒载体、整合率低的腺相关病毒载体、只整合分裂细胞的传统逆转录病毒载体,有鲜明的特色。大量文献研究表明,慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等,又很少引发机体免疫反应,能达到良好的基因治疗效果,具有广阔的应用前景。已成为国际上最通用的转染系统之一,广泛用于各类实验室。应用范围
将目的基因/RNAi转入难以转染的细胞,比如神经元细胞、干细胞;
将目的基因/RNAi转入动物组织,以期获得长期表达;
构建稳定表达目的蛋白/RNAi的细胞系,再用ex vivo的方法导入动物体内;
基因治疗;转基因动物;基因敲除;
药物研究:构建表达受体蛋白的细胞系,研究药物的作用;
快速建立生产目的蛋白的细胞系,非常有前途的真核细胞表达方法。
永诺生物提供一站式稳定细胞系构建,只需一个基因编号,即可调取目的基因、siRNA片段设计、siRNA干扰效果、慢病毒载体构建、慢病毒包装、稳定细胞系筛选构建过表达或基因敲除的稳定细胞系,并会对构建的稳定细胞系中目的基因Western blot、QPCR检测,确保其准确性。无论是过表达、shRNA还是miRNA,稳定性高、重复性强,使您的研究更得心应手。
服务优点
使用第三代四质粒包装系统,生物安全新更高;
采用VSV-G包膜,宿主范围更广;
产生的慢病毒滴度高,可达10
8~10
10TU/mL;
多种报告基因(GFP、RFP、Luciferase、Puromycin、Neomycin等);
多种启动子(CMV、PGK、EF1、U6、H1等)可供选择;
更可根据客户要求进行启动子或者报告基因改造,个性化定制!
| 服务项目 | 服务描述 | 实验周期(工作日) |
| 常规慢病毒制备 | 慢病毒包装、浓缩及滴度检测 可提供1×107TUs/ml病毒液1ml | 10-15 |
| 高慢病毒制备 | 慢病毒包装、浓缩及滴度检测 可提供1×108TUs/ml病毒液1ml | 10-20 |
| 过表达稳定细胞系构建 | 提供从载体构建,病毒包装,稳定细胞系构建到过表达效率鉴定的一整套服务。赠送相应的空载体对照稳定细胞系 | 40-60 |
| knockdown稳定细胞系构建 | 提供从载体构建,病毒包装,稳定细胞系构建到knockdown效率鉴定的一整套服务。最终提供2株插入不同有效干扰片段的稳定细胞株,赠送相应的阴性对照稳定细胞系 | 40-60 |
| miRNA过表达或抑制稳定细胞系构建 | 提供从pri-miRNA或miRNA Sponge载体构建,病毒包装,稳定细胞系构建到过表达效率鉴定的一整套服务。赠送相应的阴性对照稳定细胞系 | 40-60 |
客户提供信息
基因序列,基因号,细胞,种属信息,如需要非常见培养基需要客户提供培养基,原代细胞需要预实验。
提供结果
稳定细胞株或病毒液及对照
实验报告
SCI标准作图 (附实验报告)
实例结果
【以上实例结果均为永诺生物自主实验整理所得,请勿随意盗用,更多资讯欢迎致电020-84298069】