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北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)
SMM CHO-SI无血清哺乳动物细胞培养基
SMM CHO-SI无血清哺乳动物细胞培养基
价 格：
￥650
品 牌：
Sino Biological
产 地：
北京
最新更新日期：
2021-06-11 17:57
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北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)
我要认领
公司：
北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)
联系人：
客服部
联系电话：
010-50911666-8107
联系邮箱：
marketing@sinobiological.cn
QQ：
2767378637
产品属性
品系
无
ATCC Number
无
细胞类型
CHO
肿瘤类型
无
CAS号
无
供应商
北京义翘神州科技有限公司
数量
99
注册证号
无
英文名
SMM CHO-SI Expression Medium (Serum free, without L-Glutamine)
生长状态
良好
年限
无
运输方式
低温
器官来源
无
是否是肿瘤细胞
否
细胞形态
悬浮
免疫类型
无
物种来源
无
相关疾病
无
组织来源
无
规格
1 L
产品说明
产品描述
SMM CHO-SI 培养基主要是为提高CHO稳定株的蛋白产量而开发的，无血清，无动物源成分的培养基。不含L-谷氨酰胺，使用时需加入4mM的L-谷氨酰胺。不含HT。
产品特点
蛋白表达量高，细胞生长好，严格的质控，批次稳定性好。
产品用途
仅用于科学研究，不推荐用于人类或动物的诊断和治疗。
储存条件
2-8℃避光储存12个月。
细胞培养方法
（一）细胞复苏
1.取出冻存管，迅速在37℃水浴锅里融化，整个过程最好控制在1分钟以内。
2. 轻轻地混匀细胞并全部移到50ml的离心管中，逐滴加入 5-8ml在37℃水浴锅里预热的新鲜培养基。100g，5min离心细胞。
3. 倒掉上清，用10-20ml在37℃水浴锅里预热好的新鲜培养基重悬细胞，放到100ml培养瓶中。然后将细胞放到37℃，5%的CO2恒温摇床中，110-175rpm培养。
4. 2-5天后取样计数细胞密度和活率，如果细胞密度达到1.0X106cells/ml，则进行正常传代培养；如果细胞密度低于1.0X106cells/m，则收集细胞进行离心处理，100g，5min。然后重悬到20-30ml已经在37℃水浴锅里孵育好的新鲜培养基，继续培养。
5. 细胞生长正常后，传代时起始密度控制在0.3X106cells/ml ，3-4天传一次代。
注意事项：冻存管融化速度越快越好；由于刚复苏的细胞比较脆弱，所以整个过程要轻以免损伤细胞。
（二）细胞传代
1. 取样计数细胞，计算细胞密度。
2. 按照起始细胞密度0.3-0.4X106cells/ml，计算所需细胞悬液和培养基的用量传代，100ml的培养瓶中放15-20ml培养（或250ml的培养瓶放50-60ml培养）。37℃恒温培养箱中培养，5%CO2，摇床转速：110-175rpm。
3. 每3-4天传一次代，起始细胞密度传到0.2-0.3X106cells/ml。
如何使 CHO稳定株细胞适应SMM CHO-SI培养基：
通常情况下，细胞不经过驯化而能直接适应SMM CHO-SI培养基，下面我们推荐2种方式来更换培养基：1）直接更换；2）逐步更换。首先选用的细胞要在对数生长期，同时细胞活率大于90%。
（三）直接更换
1. 细胞培养在加5-10%血清传统的培养基或其他无血清培养基里，直接稀释传代到SMM CHO-SI培养基，细胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml。
2.然后放入5%CO2、37℃的恒温培养箱中，110-175rpm转速条件下培养。
3. 3-5天后进行传代或者换液。
4. 继续传代培养，起始细胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，直到完全适应SMM CHO-SI培养基。
5. 经过几代在100%的 SMM CHO-SI培养基中培养，传代后4-6天细胞的密度可以达到2-3X106cells/ml，细胞活率大于90%。这时说明细胞已经完全适应SMM CHO-SI培养基。
注意: 如果直接更换没有成功，则进行逐步更换的方法。
（四）逐步更换
1.细胞培养在加5-10%血清传统的培养基或其他无血清培养基里，稀释传代，细胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，原培养基与SMM CHO-SI培养基的比例为75:25。
2.然后放入5%CO2、37℃的恒温培养箱中，110-175rpm。
3. 3-5天后进行传代，如果细胞生长正常，则传代时原培养基与SMM CHO-SI培养基的比例为50:50. 细胞密度仍控制在0.3-0.4X106cells/ml。
4. 重复步骤3逐步增加SMM CHO-SI培养基的比例（原培养基与SMM CHO S I培养基的比例为25:75；10:90）直到100%的SMM CHO-SI培养基。
5.在100%的SMM CHO-SI培养基中，传代后4-6天细胞的密度可以达到2-3X106cells/ml，细胞活率大于90%。这时说明细胞已经完全适应SMM CHO-SI培养基。
（五）冻存细胞
冻存细胞时CHO cells 要处在对数生长期同时细胞活率在90%以上。
1.取样计数细胞，根据冻存管数计算所用细胞悬液体积和冻存液的体积，比例如下：92.5%的培养基混合物（50% 的新鲜SMM CHO-SI培养基+50% 条件SMM CHO-SI培养基 ）+ 7.5% DMSO，最终的细胞数为 5 x 106cells/ 管。
2.准备相应体积的冻存培养基：46.25% 的新鲜SMM CHO-SI培养基 + 7.5% DMSO，放在4°C 备用。冻存培养基最好为当天配制。
3.通过100g，5-10min离心收集细胞，留46.25%条件培养基重悬细胞，然后逐滴加入事先准备好的放4°C 的冻存培养基。
4.混合均匀后分装细胞到冻存管中，一般2ml的冻存管放1-1.5ml，贴好标签。
5.然后放到冻存盒中，放入-80°C 冰箱(每分钟下降1°C)。
6.-80℃冰箱中过夜放置（至少放置24小时），转移细胞到液氮罐中，推荐储存条件在-125°C 到 -200°C。
北京义翘神州科技股份有限公司（Sino Biological Inc.）是一家从事生物试剂研发、生产、销售并提供技术服务的生物科技公司，主要业务包括重组蛋白、抗体、基因和培养基等产品，以及重组蛋白、抗体的开发和生物分析检测等服务。
义翘神州为全球的药品研发企业和生命科学研究机构提供高质量的生物试剂产品和高水平的技术服务，能够覆盖生命科学研究的多个领域，为分子生物学、细胞生物学、免疫学、发育生物学、干细胞研究等基础科研方向和创新药物研发提供“一站式”生物试剂产品和技术服务。客户涵盖大学、科研院所、医药研发企业等国内外各类生物研发单位。目前公司已经在美国、欧洲等地建立了子公司，在上海建立分公司，已成为生物试剂行业国内领先的科技公司之一。
凭借多年病毒蛋白研究技术优势，义翘神州仅用11天就成功表达出新冠病毒重要靶点受体结合域蛋白。为了更好的支持新冠病毒研究，义翘神州已开发生产近百种新冠病毒相关科研试剂，包括重要靶点抗原蛋白、中和抗体、抗原蛋白检测试剂盒等。义翘神州还可以提供新冠假病毒中和检测服务，可用于筛选出具有中和活性的抗体或血清，支持在细胞水平上的评估。目前，这些科研试剂已被全球数百家研究机构用于疫苗和抗体开发及基础机制研究。
