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小鼠胚胎成纤维细胞

价格：￥1100

品牌：立沃生物

产地：中国深圳

最新更新日期：2021-06-11 18:06

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立沃生物科技（深圳）有限公司

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公司：立沃生物科技（深圳）有限公司

联系人：周明

联系电话： 19902901483

联系邮箱：zm001@liver-biotech.cn

产品属性

供应商

立沃生物

数量

999

生长状态

贴壁

年限

一年

运输方式

液氮

英文名	Mouse embryonic fibroblasts

规格

1million

产品说明

小鼠胚胎成纤维细胞
Mouse embryonic fibroblasts
（可贴壁，Cat# LV-MEF001）
(仅用于科学研究)
该说明书方法适用于本公司小鼠胚胎成纤维细胞，您使用时，请按随货的说明书操作，如有任何疑问可咨询公司技术人员。
I 简介
本公司小鼠胚胎成纤维细胞分离至SPF级小鼠，取12-14天胎鼠，采用酶消化分离并进一步纯化所得。细胞来源清晰，活力高（>90%），纯度高（>90%），性价比高，可广泛应用于基础生命科学研究以及药物研发中。公司可个性化定制原代细胞，满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-冻存小鼠胚胎成纤维细胞（Cat# LV- EF001）
-一次性移液管
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头）
-生物安全柜
-冷冻离心机（可离心15ml离心管，4°C预冷）
-37^oC/5%二氧化碳培养箱
-成纤维细胞培养基（DMEM or RPMI-1640，10%FBS，1%PS）
-75%酒精
-自动移液枪
-恒温水浴锅（38°C预热）
III 细胞的复苏与铺板
1. 将成纤维细胞培养基放入38°C恒温水浴锅中充分预热。
2. 将冻存的成纤维细胞从冷藏位置迅速转移至38°C恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38°C水中，作规律的水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
3. 解冻冻存管约90-120秒，直至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4. 1000rpm，4°C离心5分钟；去掉上清并用成纤维细胞培养基重悬。
5. 根据经验，沉淀的细胞用成纤维细胞培养基重悬并定容至5ml，用台盼蓝排除法测定细胞的存活率和细胞总量。
6. 将细胞以4×10⁴个细胞/cm2的密度接种至培养皿中。摇匀，在37°C / 5% 二氧化碳培养箱中培养。24小时后换液，以后隔天换液。
IV 胚胎成纤维细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到80%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜成纤维细胞培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 1000rpm，4°C离心5分钟；去掉上清并用成纤维细胞培养基重悬。
6. 以1：3或者1：4传代，将细胞悬液接种到新的细胞瓶内，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
Ⅴ联系方式
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）

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