产品简介：

无甘油T7 RNA聚合酶(HC)是一种高浓度(1,000 U/μL) DNA依赖的RNA聚合酶。该酶高度特异识别T7噬菌体双链的启动子序列，从5′→3′合成与启动子下游的单链DNA或双链DNA模板链互补的RNA。

T7 RNA聚合酶是一种源自T7噬菌体的DNA依赖性RNA聚合酶，是体外转录(IVT)的行业标准酶。它可以有效地结合标准或修饰的三磷酸核糖核苷酸(NTPs)，快速合成大量mRNA，使其成为体外合成标记或未标记RNA的理想酶，用于科研、诊断或临床应用。应用于依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)， mRNA疫苗生产，以及基于RNA的治疗和研究应用，包括用于RNA干扰药物的miRNA和siRNA合成，用于CRISPR/Cas9体系中的sgRNA合成。

T7 RNA聚合酶在无甘油存在的情况下提供卓越的性能，可用于开发可靠的体外转录检测。此外，它额外具有可兼容冻干的特性，冻干后可以用于常温储存，或用于微型检测体系。

产品应用：

RNA合成 (包括mRNA和sgRNA)；

合成用于杂交的RNA探针或用于体外RNA翻译的RNA模板；

合成放射性标记/荧光标记RNA探针；

生产反义RNA；

依赖核酸序列的等温扩增(NASBA)。

产品优势：

★ RNA 产量：凝胶电泳

将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和Lyo-ReadyTM可冻干转录缓冲液一起冻干进行反应，同时与新鲜配置的MDX201，NEB T7 RNA聚合酶和ThermoFisher T7 RNA聚合酶进行对比验证。反应在37℃下孵育24小时，反应产物通过RNA提纯试剂盒（提取柱法）纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖凝胶上检测，使用溴化乙啶染色，紫外荧光观察。检测结果显示与同类T7 RNA聚合酶相比，使用MDX201合成的RNA产量要高得多。

★ RNA 产量：分光光度仪检测

使用0.1 ng的双链DNA模板编码的1 kb或4.5 kb的RNA进行体外转录反应。分别使用冻干的无甘油T7 RNA聚合酶(HC) (MDX201，红色)、NEB T7 RNA聚合酶(橙色)和ThermoFisher T7 RNA聚合酶(黑色)在37℃下孵育8小时，比较它们转录的RNA产量。其中在不同时间点的反应管被取出放到-20°C以停止反应，然后在最后一个反应时间点后统一通过RNA提取试剂盒（提取柱法）纯化后在 NanoDropTM 分光光度仪上检测RNA浓度。检测结果显示，在不同时间点使用MDX201进行转录得到的RNA产量都要远远高于对比试剂。

★ 冻干后酶的活性不受影响

将无甘油T7 RNA 聚合酶 (HC) (MDX201) 和 Lyo-ReadyTM可冻干转录缓冲液一起冻干后保存在37°C进行加速热稳定性检测，与新鲜配置的MDX201进行的转录反应进行对比。反应在37°C进行2小时，反应产物通过RNA提纯试剂盒（提取柱法）纯化。纯化后的RNA在1.5%琼脂糖凝胶上检测，使用溴化乙啶染色，紫外荧光观察。结果显示，无甘油T7 RNA聚合酶(HC)不受冻干影响，在复溶后依然保持相同的活性。

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