名称RPMI 8226 (人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞) (STR鉴定正确)

  别称RPMI 8226; RPMI.8226; RPMI8226; RPMI no 8226; 8226; RPMI 8226/S; RPMI-8226S; RPMI8226/S; 8226/S; Roswell Park Memorial Institute 8226; GM02132; GM2132; GM 2132; Simpson

  种属人类

  年龄(性别)男性，61岁

  组织来源外周血，B淋巴细胞

  生长特性悬浮细胞

  细胞形态淋巴母细胞样

  背景描述没有证据表明，RPMI 8226细胞能产生重链(细胞质型或分泌型)。

  生物安全等级1

  生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

  推荐传代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

  推荐换液频率2~3次/周

  冻存条件

  冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

  温度：液氮

  培养条件

  气相：空气，95%;CO2.5%

  温度：37℃

  注意事项该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。

  保藏机构ATCC; CCL-155 ATCC; CRM-CCL-155 DSMZ; ACC-402 ECACC; 87012702

  细胞处理：

  1) 冻存细胞的复苏：

  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

  2) 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

  对于贴壁细胞传代可以参考以下方法

  1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

  3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

  3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

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