质粒载体网细胞购买lx-2人肝星形细胞

智立中特生物
武汉
2023-12-12 10:22

智立中特(武汉)生物科技有限公司

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肖素素
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产品规格
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zl-0568551×10⁶cells/T25培养瓶现货面议
产品说明
  细胞名称LX-2(人肝星形细胞)

  种属人

  年龄(性别)

  组织来源

  生长特性贴壁

  细胞形态上皮细胞样

  背景描述

  生长培养基DMEM高糖+10%FBS+1%P/S

  培养条件气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃

  细胞处理:

  1)冻存细胞的复苏:

  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

  悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

  3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

  下面T25瓶为例;

  1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

  2.1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

  3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

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