Beta-TC-6（小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞）来源于转基因小鼠中生长的一个胰肿瘤(胰岛素瘤)，这种小鼠携带了大鼠胰岛素Ⅱ基因启动子调控的SV40早期基因的假基因结构。Beta-TC-6细胞包含大量的胰岛素和小量的胰高血糖素及生长抑素；Beta-TC-6细胞能响应葡萄糖而分泌胰岛素。

  种属：小鼠

  年龄（性别）

  组织来源胰；胰岛素瘤

  生长特性：贴壁

  细胞形态：上皮细胞样

  生长培养基：DMEM高糖＋15%FBS＋1%P/S

  培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

  细胞处理：

  1）冻存细胞的复苏：

  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

  2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。

  该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

  1.收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

  2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

  3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

  3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

  注意事项：

  1.Beta-TC-6（小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞）生长缓慢，这些细胞从冷冻保存中恢复需要几天的时间。开始时通常具有少量可存活的漂浮细胞，其最终会形成簇并粘附在培养瓶底部，它们成簇地连接并形成堆积细胞的岛屿。细胞不会完全百分之百融合，培养物上会粘附可存活的漂浮细胞，可通过温和离心保留。在添加细胞前，培养基至少要提前15-30分钟平衡温度和PH。

  2.该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/LNaHCO3）培养基培养细胞时需要提高CO2浓度（7%-10%）。

  2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

  3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。