碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种常用的细胞核荧光染料，作为一种溴化乙锭（EB）的类似物，能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。PI经488 nm荧光激发，产生相对较大的斯托克司频移后，并在617 nm处具有最大发射波长。另外，PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外，但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性，PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。不仅可单独使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。

本品是无菌的即用型PI染色液（溶于PBS），可进入死细胞内与DNA结合，并被活细胞排斥在外，适合用于流式细胞仪进行细胞活力分析。PI单染用FL2通道检测，若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测。

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。4 ºC避光保存，6个月稳定。

使用方法

1）收集细胞，计数，最高以1 x 106 cells/100 μL的量加入FACS分选管；

2）加2ml PBS（或HBSS）清洗细胞，300 x g离心5 min，去上清。重复一次。

注：若需要用抗体标记表面抗原，可在此步之后进行。PI不适合与检测胞内分子的抗体联合使用。

3）细胞清洗后，用100 μL流式细胞染色缓冲液（flow cytometry staining buffer）重悬细胞；加入10 μL PI染色液，轻柔混匀，冰上或者室温避光孵育10-15 min。

4）直接上机进行流式分析。注：PI染色后不可再清洗细胞。PI染色孵育后尽快上机检测。

注意事项

1） 碘化丙啶（PI）是已知的诱变剂，操作过程中一定要做好防护工作避免与PI的直接接触。另外PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。

2） 流式细胞染色缓冲液可配制如下：1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA（或 5% FBS）＋0.1% 叠氮钠。也可根据实验室自身体系调整。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。