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小鼠外周血单核细胞

价格：￥3200

品牌：立沃生物

产地：中国深圳

最新更新日期：2021-06-16 17:50

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立沃生物科技（深圳）有限公司

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公司：立沃生物科技（深圳）有限公司

联系人：周明

联系电话： 19902901483

联系邮箱：zm001@liver-biotech.cn

产品属性

供应商

立沃生物

数量

999

生长状态

贴壁

年限

一年

运输方式

液氮

英文名	Mouse PBMC

规格

20million

产品说明

PBMC复苏与铺板(仅用于科学研究)
I 试剂与材料
-冻存PBMC（Cat# LV-PBMC001/002）
-培养基（完全RPMI1640，见下表）
-37°C恒温水浴锅
-生物安全柜
-15ml离心管
-37^oC/5%二氧化碳培养箱
-宽口滴管和宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头，再灭菌使用）
-自动移液枪
II 细胞的复苏与铺板
1. 完全RPMI1640培养基放入37°C度恒温水浴锅中让其充分预热（在生物安全柜中取出12ml培养基于无菌离心管中用于5，6步解冻）。
2. 将冻存的PBMC从冷藏位置迅速转移至37°C度恒温水浴锅中。尽可能多的浸入37°C度水中，作规律的水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
3. 解冻冻存管至刚好完全溶解成液体，约60-120秒，。
4. 用75%酒精对冻存管消毒，并将其转移到生物安全柜。
5. 小心地将解冻后的细胞吸出，移至15ml离心管，并用培养基润洗一遍冻存管及吸取细胞的枪头。
6. 一边摇晃离心管，一边加入完全RPMI1640培养基至12ml（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并摇晃，后面9ml可加快速度），最后上下颠倒混匀。
7. 20℃，1800rpm，升速7，降速4，离心8min。
8. 弃上清，加入3ml完全RPMI1640培养基重悬细胞，并用台盼蓝染色计数。
9. 重复第7步，用完全RPMI1640培养基重悬细胞，并按9x10⁶cells/cm²密度铺板。
10. 在37°C / 5% 二氧化碳培养箱中培养。
III 完全RPMI1640培养基

成分	用量
不完全RPMI1640溶液	500ml
左旋谷氨酰胺（L-Glu）	2mM
（2-ME）	50μM
青霉素(Penicillin)	100μg/ml
链霉素(Streptomycin)	100μg/ml
FCS(56℃灭活30min)	50ml

Ⅴ联系方式
公司电话：0755-28284050

技术支持：19902901483（周博士）

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