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小鼠胰腺星状细胞（永生化）

价格：¥1

品牌：mingzhoubio

最新更新日期：2021-06-16 17:55

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宁波明舟生物科技有限公司

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公司：宁波明舟生物科技有限公司

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产品属性

生长状态

良好

运输方式	干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶）

器官来源	实验动物的正常胰腺组织

是否是肿瘤细胞

否

细胞形态	多角型或星型细胞，不规则细胞

物种来源

小鼠

产品说明

细胞形态：贴壁生长
细胞数量：1*10^6
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）
Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例:
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。