中文名：UE Green I, 20× in DMSO（PCR级）

英文名：UE Green I, 20× in DMSO（PCR Grade）

纯度：20× in DMSO

货号：D346202

存储温度：2-8°C储存,避光

运输条件：冰袋运输

产品介绍：

储存条件

本产品 4℃避光保存，有效期见外包装。使用前，将产品室 温下解冻，并轻轻涡旋混匀，解冻后所有实验应在冰上操作。 该产品避免反复冻融。

产品介绍

Biolife Green I是一种结合于dsDNA 双螺旋小沟区域的 具有绿色发射光的荧光染料。Biolife Green I 与 dsDNA 结合 后荧光信号会增强 800-1000 倍，是一种常用的 qPCR 荧光 染料。该染料经济实惠、使用方便，具有高灵敏度，信噪比 高等优势，可应用于基因表达差异分析，基因芯片等。

使用方法

1. 建立如下实验体系：（仅供参考）

名 称	体 积
10×的无 Mg 2+聚合酶缓冲液	5 µL
50 mM MgCl2	2.5 µL
2 mM dNTP	5 µL
20×Biolife Green	2.5 µL
Taq DNA polymerase	1-5 units
F, R Primers	各 0.1-0.5 µM
模板 DNA	适量
dH2O	补充总体积至 50 µL

注：DNA 模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同种类的 DNA 模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯 度稀释，确定合适的 DNA 模板添加量。cDNA 作为模板时 的添加量不要超过 PCR 反应液总体积的 10%。
2. 执行实时定量 PCR 程序，采集荧光信号。

程序	温度	时间	循环
酶激活	95℃	2 min	1
变性	95℃	5 s	45
退火	50-60℃	5 s	45
延伸	72℃	25 s	45

3. 分析数据。
注意事项

1. Biolife Green I 的使用浓度是保证荧光定量 PCR 实验成功 的关键因素。染料浓度过低会使荧光信号变化降低，导致低 拷贝的样品可能无法检出，而在高浓度时又会抑制 PCR 反 应。所以一般在使用 Biolife Green 染料时应根据实际情况优 化使用浓度，反应的终浓度为 1×到 0.2×之间。 2. 提高 Mg 2+浓度可以降低 Biolife Green I 对 PCR 反应的抑 制作用。我们建议在用Biolife Green I 进行荧光 PCR反应时， Mg 2+浓度比无 Biolife Green I 的普通 PCR 反应高出 0.5～3 mM。 3. 为了您的健康，请穿实验服并戴一次性手套进行操作。

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