产品简介

T4 DNA Ligase(Fast) 由携带 T4 噬菌体 gene 30 的大肠杆菌产生。该酶催化双螺旋 DNA 或 RNA 之间的5'-磷酸基团和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。该酶在双链DNA、RNA或者DNA/RNA复合物间可修复单链缺刻 , 并且可以连接有粘性末端或者平末端的DNA片段，但对于单链核酸无活性，主要用于限制性内切酶酶切产物DNA片段克隆、基因定点突变与 PCR产物克隆、线性DNA自环化与修复双链DNA缺刻。T4 DNALigase(Fast) 需要ATP作为辅助因子，在室温下完成粘性末端连接反应仅需10分钟。

酶活单位定义

37℃条件下，1 Weiss unit的酶在20 min内催化1 nmol的[32 PPi]转变为活性炭吸附态。1 Weiss unit等同于约200个粘性末端连接反应单位（CEU），相当于在16℃条件下，30 min内连接50% HindIII 消化后的 λDNA 片段。

酶活检测条件

酶活在如下反应混合物中进行测试：66mM Tris-HCl (pH7.6)，6.6

mM MgCl2 ,66μM ATP,10mM DTT,3.3μM [32PPi]。"