血液直扩PCR试剂盒

480元
Proandy
陕西西安
2025-12-01 16:12

陕西普罗安蒂生物科技发展有限公司

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付武
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产品说明

血液直扩PCR.jpg

血液直接PCR试剂盒

产品概述】

本试剂盒可以直接对血液样本进行PCR检测,无需进行DNA纯化或样品预处理,避免样本交叉污染问题。可用于直接扩增的血样类型包括:新鲜血液、4℃贮存血液、冷冻血液以及储存在Whatman903FTA商用卡上的干血渍,且兼容所有常规抗凝剂(EDTA、柠檬酸盐、肝素等)。本产品使用简便,可有效扩增高 GC 含量的模板和引物。

【产品组分】

组分

规格

储存温度

2×Blood Direct PCR Mix

1ml

-20℃

RNase-Free ddH2O

1ml

常温

【使用方法】

注意:以下举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定优化反应条件。

PCR反应体系

20μl反应体系为例

组分

推荐用量

推荐终浓度

2×Blood Direct PCR Mix

10μl

1X

Forward Primer(10μM)

0.5μl

0.2-0.4μM

Reverse Primer (10μM)

0.5μl

0.2-0.4μM

血液模板

1μl


ddH2O

补足至20μl


注:各组分使用前应充分混匀。

1. 模板使用量:建议按1-10 %总体系量取用模板20 μl体系建议采用1 μl血液作为模板;

2. 引物终浓度:0.2-0.4 μM可以得到较好结果。反应性能较差时,可在0.1-0.5 μM范围内调整引物浓度;

3. 反应体系:推荐使用20 μl,也可根据使用习惯调整体系体积大小;

4. 体系配制:配制好PCR反应体系,置于涡旋仪上涡旋混匀,瞬时离心将反应液集于管底。

PCR 反应条件

步骤

温度

时间

循环数

预变性

98℃

3min

1 cycle

变性

98℃

15sec

35 cycles

退火

56

15sec

延伸

72℃

15sec/Kb

终延伸

72℃

5min

1 cycle

*退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值2-5℃,或通过梯度PCR确定最佳温度。

【琼脂糖凝胶电泳】

PCR产物可直接点样跑琼脂糖凝胶(不需Loading Buffer)。

【对照反应】

PCR结果分析时,不管是阳性结果或阴性结果,如果没有对照反应,都不能确定结果是否可靠。为了便于后续实验结果的分析,建议在进行PCR时,设置阳性和阴性PCR对照反应以便于排除假阳性或假阴性的干扰。

【注意事项】

1. 过多的血液模板会抑制PCR扩增反应,在20 μl反应体系中,适宜的模板加入量为1 μl。初次实验时,建议在1-5 μl范围内设置梯度模板加入量,以便找到适宜模板用量。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。

3. 本产品仅作科研用途!