本试剂盒采用竞争 ELISA 法，在酶标板条微孔上预包被抗原。在试验中，加入待检血清与酶标记物，样品中含有 FMDV 特异性抗体，则与酶标记物中的酶标记抗体竞争板孔中包被的抗原表位，温育后将多余的游离抗体通过洗涤去除，在微孔中加入 TMB 显色液，经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比，加入终止液终止反应后酶标仪 450nm 波长测定反应孔中的吸光度 OD

【样品制备】

取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮

【洗涤液的准备】

浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作 10 倍稀释涤液可在 4℃存放一周左右。

【注意事项】

1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，应将试剂盒各组份放置室温至少 1 小时。使用前应摇匀，使用后尽快放回

保存。

2. 不同产品或同一产品不同批号试剂盒的试剂组分不得混用使用试剂时应防止试剂交叉污染或被样品污染

3. 底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性，防护。

4. TMB（显色液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂口蹄疫病毒 ELISA 抗体检测试剂盒

6. 检测板为一次性用品，不得重复使用

7. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染环境

8. 操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程应严格遵守操作说明，以获得最佳结果。

【操作步骤】

1. 每次试验均设置阳性对照 1

2. 将待检板条按 20ul /孔加入样本稀释液

3. 将样品和阴阳性对照品按 20ul勿混用）；

4. 每孔加酶标记物 60μl，轻微震荡混匀37℃温育 45 分钟。

5. 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液液每孔加 250ul，后甩去孔内液体最后在干净吸水纸上拍干。

6. 每孔加显色液 100µl，混匀，分钟。

7. 每孔加终止液 50μl，使反应终止

【结果判定】

用酶标仪于 450nm（630nm 作参比波长试验成立的条件：