MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务。

钙黄绿素-AM

MCE 国际站：Calcein-AM

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-D0041

CAS：148504-34-1

中文名称：钙黄绿素-AM

Synonyms：钙黄绿素-AM; Calcein acetoxymethyl ester

纯度：≥98.0%

存储条件：-20°C, 避光 *溶剂中：-80°C, 6 个月; -20°C, 1 个月（避光）

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Calcein AM，中文名为该黄绿素乙酰氧基甲指，具细胞膜渗透性，可轻易进入到细胞内，Calcein AM 身并无荧光，进入细胞后被细胞中内源性酯酶水解生成具有强负电荷的不能通透细胞膜的极性分子钙黄绿素 (Calcein)，从而被滞留在细胞内。而 Calcein 可发出强绿色荧光，因此常与 Propidium Iodide 用于细胞活力/毒力检测，激发/发射波长：494/515 nm。

生物活性：Calcein-AM 是一种可渗透细胞的荧光染料，用于确定细胞活力。 体外用于活细胞染色的钙黄绿素-AM 染料在 37°C 下 4 小时内的自发渗漏率低于 15%。被钙黄绿素-AM 染色的靶标的稀释度与测得的荧光值呈线性关系。 NK 细胞、LAK 和 CTL 很容易通过这种微量测试检测到。使用测试系统^[1] 可轻松进行杀伤定量和动力学分析。 Calcein-AM 与 pH 无关，保留更好，光稳定性更好。此外，钙黄绿素-AM 在细胞内的高水平保留及其掺入后的低水平释放排除了可能的细胞单层标记，并允许其用于细胞-细胞相互作用测定。此外，明亮的荧光很容易被酶标仪检测和测量^[2]。钙黄绿素-AM 是一种高度亲脂性的活性染料，可快速进入活细胞，被细胞内酯酶转化为钙黄绿素，产生强烈的绿色 (530 nm) 信号，并被具有完整质膜的细胞保留。从膜完整性受损的垂死或受损细胞或表达多药耐药蛋白 (MRP) 的细胞中，未水解的底物及其荧光产物迅速从细胞中挤出。钙黄绿素-AM 检测已被用于评估细胞活力、细胞毒性和 tp 定量细胞凋亡^[3]。 体内：钙黄绿素-AM 被发现适用于体内 研究，因为它对细胞功能没有有害影响，而且确实，细胞活力的标志物^[2]。

体外：使用方法1.Calcein AM 工作液的配制用 DMSO 配置 5 mM 储备液，再用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Calcein AM 工作液。注：请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度，且现用现配。2. 细胞染色（悬浮细胞）2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。2.2 加入 1 mL Calcein AM 工作液，37℃ 孵育 30-45 分钟。2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。3. 细胞染色（贴壁细胞）3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，37℃ 孵育 30-45 分钟。3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或荧光酶标检测仪进行观察。 保存条件-20℃ 避光保存 注意事项1. 请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度与孵育时间。2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

体内：Calcein-AM 被发现适用于体内研究，因为它对细胞功能没有有害影响，而且确实是细胞活力的标志物[2]。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

细胞实验：K562、Daudi 和 Chang 肝细胞用钙黄绿素-AM 标记。钙黄绿素-AM 的激发和发射波长分别为 496 nm 和 520 nm。用于检测钙黄绿素-AM 绿色荧光的滤光片/镜面组合包括 490 nm 激发和 520 nm 发射滤光片以及二向色镜。测试孔和对照孔之间的自动荧光读数差异决定了结果[1]。使用钙黄绿素-AM 建立了一种简单而灵敏的细胞间粘附微孔板测定法。该程序包括三个步骤：在短孵育期（30 分钟）内用足够浓度的钙黄绿素-AM（20 μM）标记淋巴细胞；将每孔 2×105 个标记淋巴细胞粘附到微孔板中生长 90 分钟的汇合角质形成细胞或成纤维细胞单层上；最后，利用一种新的冷光微荧光测定系统测量荧光信号[2]。将细胞放入含有 0.05% 叠氮化钠的 PBS 缓冲液（pH 7.4）中 1 mL 1% 皂苷溶液中孵育 15 分钟。皂苷透化后，将 4×105 个红细胞悬浮在含有 0.1% 皂苷和 0.05% 叠氮化钠的 PBS 缓冲液中，与钙黄绿素-AM 孵育（37°C，黑暗条件下孵育 45 分钟），直至最终浓度为 5 μM，再用含有 0.1% 皂苷和 0.05% 叠氮化钠的相同 PBS 缓冲液清洗三次，然后通过流式细胞术分析细胞活力[3]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

Emission (Em)：515

Excitation (Ex)：485

热销产品：CD1530  | GW 441756  | Nelarabine  | Nitro blue tetrazolium chloride  | Oseltamivir  | Dracorhodin perchlorate  | Fluvastatin (sodium)  | Istaroxime (hydrochloride)  | Methylprednisolone succinate  | Canagliflozin (hemihydrate)

Trending products：Recombinant Proteins  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Wang XM, et al. A new microcellular cytotoxicity test based on calcein-AM release. Hum Immunol. 1993 Aug;37(4):264-70.
[2]. Braut-Boucher F, et al. A non-isotopic, highly sensitive, fluorimetric, cell-cell adhesion microplate assay using calceinAM-labeled lymphocytes. J Immunol Methods. 1995 Jan 13;178(1):41-51.
[3]. Bratosin D, et al. Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viabilityand aging. Cytometry A. 2005 Jul;66(1):78-84.
[4]. Holló Z, et al. Calcein accumulation as a fluorometric functional assay of the multidrug transporter. Biochim Biophys Acta. 1994 May 11;1191(2):384-8.