中文名：K599发根农杆菌甘油菌(转基因植物构建用)

英文名：K599 agrobacterium rhizobiaceae glycerol stock for construction of transgenic plant

货号：K747256

存储温度：-80℃储存,避免反复冻融

运输条件：超低温冰袋运输

稳定性存储：-80℃保存，至少2年有效。需注意避免反复冻融。

产品介绍：

产品介绍：

阿拉丁生产的K599发根农杆菌甘油菌(转基因植物构建用)，K599 agrobacterium rhizobiaceae glycerol stock for construction of transgenic plant是收集生长在对数期的K599发根农杆菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养，常用于转基因植物用菌株的构建。本菌株适用于葫芦科，豆科，茄科等植物的转基因操作。发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌含有pRi2659农杆碱型Ri质粒，同时具有链霉素抗性。K599发根农杆菌菌株基因型：Agrobacterium rhizogenes pRi2659 本菌株可以使用常规的TY培养基进行培养。关于阿拉丁不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.aladdin-e.com/

注意事项：

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1.划平板接种：取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。a.用镊子和塑料枪头操作：镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头，蘸取少量甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头，以尽量和TY平板接近平行的角度，在含50μg/ml链霉素的TY平板上连续作S形或Z形划动，再用一无菌的200µl塑料枪头，在原先的划线上以90º或120º角，再在TY平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。28-30ºC，倒置培养2-3天。b.用接种环操作：将接种环在酒精灯上略略烧一下，使接种环处于无菌状态。微冷后，蘸取少量甘油菌，在含50μg/ml链霉素的TY平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下，微冷后，在原先的划线上以90º或120º角，再在TY平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。28-30℃，倒置培养2-3天。2.直接培养：取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3ml TY (50μg/ml链霉素)的细菌培养试管内或装有100ml或更大体积TY (50μg/ml链霉素)的细菌培养瓶内。28-30℃，约200rpm培养至少24h。3.感受态细菌的制备：可以使用阿拉丁的农杆菌感受态制备试剂盒进行感受态细胞的制备。4.TY配方(1L)：a)称取Tryptone 5g和Yeast extract 3g，补水到1L体积，完全溶解后，121℃、20min高温灭菌；b)配制1M的CaCl2水溶液，121℃、20min高温灭菌；c)每1L灭菌的TY液体营养液中加入10ml无菌的1M CaCl2水溶液即可。d)若配制TY固体培养基，则加入15g琼脂粉。

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