中文名：UltraBio™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)

英文名：UltraBio™ RNA Clean Magnetic Beads

货号：R751581

存储温度：2-8°C储存

运输条件：冰袋运输

稳定性存储：4℃保存，一年有效。

产品介绍：

产品介绍：

阿拉丁研发生产的UltraBio™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)是基于固相载体可逆化固定(Solid phase reverse immobilization, SPRI)技术，使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，配合优化的缓冲体系，用于稳定、高效、便捷地从常见酶反应体系中纯化RNA或cDNA。本产品不仅适合手工实验操作，还可用于高通量的自动化移液工作站。RNA纯化和杂质的去除对于RNA相关的实验是非常重要的，包括RNA-seq、qPCR、微阵列(Microarray)等1]。本产品可广泛应用于基因测序以及分子诊断等领域，尤其适用于rRNA去除后或DNase I酶处理后的RNA纯化、体外转录产物纯化及二代测序(Next generation sequencing, NGS)文库构建过程中的RNA纯化2]。本产品和目前广泛使用的RNAClean XP (Beckman Coulter公司产品)的使用方式和效果基本一致。RNA纯化磁珠，也被称为DNA/RNA提取纯化磁珠、RNA Cleanup & Concentration、NGS Cleanup Magnetic Beads、RNA Clean & Concentrator、RNA Clean-Up、RNA Cleaner等。本RNA纯化磁珠既适用于RNA的纯化，也适用于cDNA或其它DNA的纯化，即本产品不能特异性区分RNA或DNA，但可以通过相应的DNA酶或RNA酶处理后再进行RNA或DNA纯化。本产品也不适用于从细胞或组织中直接提取RNA。本产品的主要操作流程图如1所示。样品中的RNA与磁珠结合，在外界磁场(如磁分离架)的作用下，磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离，经洗涤充分去除杂质，最后用洗脱液将RNA从磁珠上洗脱下来，即可获得高度纯化的RNA样品。图1. 阿拉丁UltraBio™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)的实验流程示意图。本产品操作便捷，回收效率高。本产品使用非常便捷，通常15分钟内即可完成RNA样品的纯化。本产品通常回收率可以达到90%以上，也适用于低浓度RNA的浓缩。本产品特异性强、RNA结合量高。本产品结合量高，对不同体系的RNA可以快速进行分离纯化，不易产生非特异吸附，可以快速有效去除未掺入的dNTP或NTP、引物、引物二聚体、盐和其它杂质。不同长度的体外转录的RNA经本产品的纯化效果参见图2。图2. 阿拉丁UltraBio™ RNA Clean Magnetic Beads (RNA纯化磁珠)纯化不同长度RNA的效果图。以4条不同长度的携带有T7 Promoter序列的线性化质粒分别为模板，通过T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit 体外转录成RNA，再经RNase free的DNase I 消化去除DNA模板后混合，经本产品纯化前后的比较。图中可见RNA的回收效率非常高。实际纯化效果会因实验条件、操作等而存在一定差异，本图仅供参考。本产品兼容性强。本产品不仅适用于少量样本的手工操作，也适用于高通量(High-throughput screening)的自动化操作系统。本产品安全环保。本产品与传统的RNA回收方法相比，避免了酚、氯仿等有机溶剂的使用，更加安全。4℃保存，一年有效。需自备无水乙醇和磁分离装置，推荐使用阿拉丁的UltraBio™磁分离架系列产品(FMS004、FMS008、FMS012、FMS016或FMS024)。操作过程要严格保证无RNase污染。请戴上口罩和手套操作，尽量防止人体表面的RNase污染样品。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒或耗材呼气或说话，以防RNase污染。对于操作环境中RNase的去除，推荐使用阿拉丁生产的RNase and DNase Away 以去除实验桌、仪器设备表面或其它接触面上的RNase。本产品的所用试剂和耗材都要求是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。如果耗材可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。本产品避免冷冻、避免高速离心。为保证RNA的回收效率，使用前须将磁珠由4℃冰箱取出，或取所需量，待其温度平衡至室温后再使用。分装或使用磁珠时，请适当漩涡震荡或反复颠倒以保证磁珠充分混匀。80% (v/v)乙醇溶液推荐现用现配，否则后续使用时可能会因为乙醇的挥发而影响回收效率。请勿长时间干燥磁珠，干燥过度将导致磁珠的不可逆聚集，从而降低洗脱效率。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1.准备工作。 a.将磁珠溶液从4℃冰箱取出，适当漩涡震荡或充分颠倒以保证磁珠充分混匀，然后取出所需的量，平衡至室温。 b.新鲜配制80% (v/v)乙醇溶液。例如分别量取8ml无水乙醇和2ml超纯水或双蒸水(RNase free)，混匀后即得约10ml 80% (v/v)乙醇溶液。超纯水推荐使用阿拉丁生产的ST876 Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)。 注：因为乙醇和水混合后体积会发生改变，所以请勿量取8ml乙醇，加超纯水或双蒸水定容至10ml。 2.RNA纯化。 a.将0.5-5µg RNA样本转移到洁净的RNase-free 1.5ml离心管(如FTUB306)。 b.根据样本体积，参照下表用量加入 RNA Clean Magnetic Beads (使用前务必混匀)，一般磁珠用量是样品体积的2倍。轻柔涡旋震荡或移液器吹打10次混匀，室温孵育5分钟。随后将离心管置于磁力架的磁珠中，室温孵育30秒，小心移除上清。 Sample Volume (µl) Beads (µl) 50 100 100 200 150 300 200 400 注1：磁珠在使用前一定要适当涡旋震荡或吹打混匀。如果希望提升RNA回收效率，可适当增加磁珠用量，延长结合时间。 注2：一般情况下磁珠用量为样品体积的1.8-2.0倍，用户也可根据实际测试效果对磁珠用量进行适当的调整。 c.保持离心管始终处于磁力架中，加入200µl新鲜配制的80% (v/v)乙醇溶液漂洗磁珠，室温孵育30秒，小心移除上清。 d.重复步骤c一次。 e.保持离心管始终处于磁力架中，打开离心管盖，室温干燥至磁珠刚刚出现龟裂状(约5-10分钟)。 注：磁珠晾干要避免过度干燥，过度干燥会导致RNA的洗脱效率降低。 f.将离心管从磁力架中取出，加入适量超纯水水(10-30µl)，轻柔涡旋震荡或使用移液器轻轻吹打以充分混匀。 g.室温孵育5分钟。 h.将离心管短暂低速离心后置于磁力架中分离5分钟，待溶液澄清后，小心吸取上清至洁净的离心管中，即完成RNA的纯化。 注：建议转移上清时保留少量液体以免吸到磁珠影响后续实验。纯化得到的RNA极易降解，建议尽快进行下一步实验。短时间内不使用时请置于-80℃保存。 参考文献： 1. Ivo Nikolaev Sirakov. From Basic Aspects to Laboratory Tools, IntechOpen. 2016. Chapter 1. 2. Zhao, W., He, X., Hoadley, K.A. et al. BMC Genomics. 2014. 15, 419.

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