中文名：UltraBio™血液RNA稳定保存液

英文名：UltraBio™ RNA Stabilization Reagent for Blood

货号：R751648

存储温度：2-8°C储存

运输条件：冰袋运输

稳定性存储：室温或4℃保存，两年有效。

产品介绍：

产品介绍：

阿拉丁的UltraBio™血液RNA稳定保存液(UltraBio™ RNA Stabilization Reagent for Blood)，简称血液UltraBio™或血液UltraBio™试剂，是一种用于采集血液样品时，仅需室温操作，即可迅速抑制RNase并稳定保存血液样品中RNA的无毒无害液态试剂。本产品广泛用于新鲜血液样品中RNA的稳定保存。本产品的使用效果和液氮冻存的效果一致。本产品可以迅速渗透到血液细胞内部，完全抑制RNase，避免RNA降解，保持血液样品RNA的完整性，从而完美保存血液细胞的基因表达谱和细胞外的RNA谱，并且和液氮一样可以长期保存样品中的RNA。本产品安全便捷。本产品无任何毒性和刺激性，可室温使用，确保了使用时的安全和便捷。和使用液氮相比，可以有效避免因使用超低温的液氮而可能引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患，并且携带、运输非常方便。本产品可稳定血液样品的RNA表达谱。常见的血液样品保存方式是4℃短时间保存，但此时血液中细胞的生命活动还在进行，基因表达谱还会发生变化，RNA提取时与血液样品收集时的基因表达谱很可能已经出现显著差异，这种显著的差异很可能会导致实验结果的不确定性。而使用血液UltraBio™试剂保存后，血液中细胞的生命活动几乎立即被终止，RNA谱也被固定，且RNA完整性更佳(图1B)。经测试，直接将全血置于

使用说明：

1.对于全血样品。a.全血的收集：收集100-300µl新鲜的血液样品，加入含抗凝剂的抗凝管中，颠倒混匀。抗凝剂推荐使用EDTA钠盐或钾盐，肝素和柠檬酸盐也可以。b.保存：按照1:5的比例加入血液RNALater™试剂，例如200µl的血液加入1000µl的血液RNALater™试剂，颠倒混匀。此时血液样品在室温可以保存一周，4℃可以保存一个月，4℃保存(过夜或更长时间)后转移至-20℃或-80℃可以至少保存6个月。c.RNA抽提时样品的处理：RNA抽提前，加入等体积的DEPC水(DNase、RNase free)或其它适当的不含RNase的水，混匀，10,000×g室温离心5分钟，小心去除上清。沉淀物或剩余体积按照1:3的比例加入RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) ，如200µl的沉淀物或剩余体积加入600µl的裂解液。随后按照步骤3或RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 使用说明进行总RNA的提取。也可以使用其它RNA抽提试剂盒中裂解液或Trizol LS等并按其说明书进行总RNA的抽提。如果希望同时抽提细胞内和细胞外的RNA，直接按照1:3的比例加入RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 中的裂解液，例如200µl含血液RNAlater™试剂的样品加入600µl的裂解液。随后按照步骤3或RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 使用说明进行总RNA的提取。也可以使用磁珠法血液RNA抽提试剂盒或其它RNA抽提试剂盒中裂解液或Trizol LS等并按其说明书进行总RNA的抽提；也可以使用磁珠法血液mRNA抽提试剂盒直接抽提mRNA。2.对于白细胞样品：a.白细胞的收集：取100-300µl新鲜的血液样品，加入含抗凝剂的抗凝管中，颠倒混匀。1500-2000×g，4℃离心10-15分钟。此时可见管中的液体分3层，上层为淡黄色血浆，底层为红细胞，在紧贴红细胞层上有一层灰白色的白细胞。吸掉上层的血浆，小心收集白细胞至新的离心管中，然后加入1ml PBS 洗涤，5000×g 4℃离心2分钟，小心吸除PBS，由于白细胞比较少，可以适当残留微量液体。b.保存：小心加入100-200µl的血液RNAlater™试剂，避免吹散沉淀。此时的白细胞样品在室温可以保存一周，4℃可以保存一个月，4℃保存(过夜或更长时间)后转移至-20℃或-80℃至少可以保存6个月。c.RNA抽提时样品的处理：方法1：直接按照1:3的比例加入RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 中的裂解液，例如200µl含血液RNAlater™试剂的样品加入600µl的裂解液。随后按照步骤3或RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式)使用说明进行总RNA的提取。也可以使用磁珠法血液RNA抽提试剂盒或其它RNA抽提试剂盒中裂解液或Trizol LS等并按其说明书进行总RNA的抽提。也可以使用磁珠法血液mRNA抽提试剂盒直接抽提mRNA。本方法简单，抽提获得的总RNA质量尚可，得率高，几乎没有损失，但由于没有去除血液RNAlater™试剂，纯度上可能会稍差一些。方法2：加入等体积的DEPC水(DNase、RNase free)或其它适当的不含RNase的水，10,000×g室温离心5分钟，小心去除上清，由于白细胞比较少，可以适当残留微量液体，然后加入RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 中的裂解液300µl。随后按照步骤3或RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 使用说明进行总RNA的提取。也可以使用磁珠法血液RNA抽提试剂盒或其它RNA抽提试剂盒中裂解液或Trizol LS等并按其说明书进行总RNA的抽提。也可以使用磁珠法血液mRNA抽提试剂盒直接抽提mRNA。本方法稍复杂，由于通过离心去除了血液RNAlater™试剂，纯度好，但在离心过程中可能会损失部分白细胞。3.血液样品总RNA的抽提：对于使用阿拉丁RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 裂解液和抽提试剂盒的样品，建议按照以下步骤进行总RNA的抽提，或参考产品使用说明。其它RNA抽提试剂盒如磁珠法血液RNA抽提试剂盒、Trizol LS等请按其说明书进行总RNA的抽提。也可以使用磁珠法血液mRNA抽提试剂盒直接抽提mRNA。a.加入等体积结合液至裂解液中，轻轻颠倒混匀3-5次。此时可能会有沉淀物产生，属于正常现象。b.将混合物(包括沉淀物)转移至纯化柱内，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。注意：当裂解液的体积大于300µl时，在加入等体积结合液后，总体积会超过纯化柱的容量，这时应分成2次过柱，即将一半的混合物过柱后，再将剩余的混合物重复步骤b一次。c.加入600µl洗涤液I，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。d.加入600µl洗涤液II，12,000×g离心30秒，倒弃收集管内液体。e.重复步骤d一次。最高速(约14,000-16,000×g)离心2分钟，去除残留的液体。f.将RNA纯化柱置于本试剂盒提供的RNA洗脱管中，加入30-50µl洗脱液，室温放置2-3分钟，最高速离心30秒，所得溶液即为纯化的RNA。用分光光度计测浓度。本试剂盒抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2。A260/A230通常为1.9-2.1。注意：洗脱液需要加到纯化柱柱面中央，使其被完全吸收。如需获得更高浓度的样品，可把洗脱液的体积减小至20µl，但洗脱下来的RNA量会相对减少。室温较低时，洗脱液在37℃预热片刻对得率有所帮助。此外，洗脱后的溶液再次加回到原纯化柱再离心洗脱一次，可提高得率约10-30%；或者在第一次洗脱后使用新的洗脱液再洗脱一次，会获得约为第一次洗脱量15-40%的RNA。

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