蛋白质银染检测试剂盒

¥400
BOSTER
武汉
2021-06-16 21:12

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客服部
027-67845390
boster@boster.com.cn
产品属性
保存条件室温
保质期一年
数量大量
供应商博士德生物
规格Kit(30次)
产品说明

产品货号:AR0171

产品名称:蛋白质银染检测试剂盒

价格规格:400元/Kit(可用30次)

产品包装:增敏液 30ml (100×);银染液 30ml (100×);显色液A 1.5ml;显色液B 120ml×5(5×)

保存条件:室温保存,一年有效;银染液和显色液A需避光保存。

注意事项

1. 需自备乙醇和冰乙酸(分析纯);

2. 请严格按照产品使用说明书进行操作;

3. 显色过程很快,要注意把握时间,避免染色过度;

4. 所用器皿要很洁净,不用手直接接触,以免杂蛋白污染;

5. 尽量用高纯度去离子水,蒸馏水更佳,可以减少背景着色;

6. 本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染,并且染色后和后续的质谱检测兼容;

7. 使用说明中的使用次数及各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶,各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大,对于更厚的凝胶,作用时间需按照厚度的比例适当延长;

8. 对于BSA蛋白,检测灵敏度可以达到0.5ng;

9. 使用本试剂盒只需90分钟即可完成银染实验。

使用方法:

1.电泳结束后,取凝胶放入约100ml固定液中,在摇床上室温摇动20分钟,摇动速度为60-70rpm。

固定液的配制(自备):加入50ml乙醇、10ml冰乙酸和40ml 去离子水,混匀。

2.弃固定液,加入100ml 30%乙醇,在摇床上室温摇动10min,摇动速度为60-70rpm。

30%乙醇的配制(自备):70ml 去离子水中加入30ml乙醇,混匀。

3.弃30%乙醇,加入200ml去离子水,在摇床上室温摇动10分钟,摇动速度为60-70rpm。

4.弃水,加入100ml增敏液(1×),在摇床上室温摇动2分钟,摇动速度为60-70rpm。

增敏液(1×)的配制:99ml去离子水中加入1ml增敏液(100×),混匀。增敏液(1×)配制后需在2小时内使用。

5.弃原有溶液,加入200ml 去离子水,在摇床上室温摇动1min×2,摇动速度为60-70rpm。

6.弃水,加入100ml银染液(1×),在摇床上室温摇动20分钟,摇动速度为60-70rpm。

银染液(1×)的配制:99ml 去离子水中加入1ml银染液(100×),混匀。银染液(1X)配制后需在2小时内使用。

7.弃原有溶液,加入100ml 去离子水,在摇床上室温摇动0.5min×2,摇动速度为60-70rpm。

8.弃水,加入100ml显色液,在摇床上室温摇动3-10分钟,直至出现比较理想的预期蛋白条带,摇动速度为60-70rpm。

显色液的配制:80ml 去离子水中加入20ml显色液B(5×),再加入0.05ml显色液A,混匀后即为显色液。显色液配制后需在20分钟内使用。

9.弃显色液,加入100ml终止液,在摇床上室温摇动10分钟,摇动速度为60-70rpm。

终止液的配制(自备):95ml 去离子水中加入5ml冰乙酸,混匀。

10.弃终止液,加入去离子水,在摇床上室温摇动2-5分钟,摇动速度为60-70rpm。

11.保存显色出的蛋白质条带并记录。