在有Mg²⁺和ATP存在的条件下，T4 DNA Ligase能催化双链 DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻，但不能催化单链 DNA 之间的连接。
产品组成：

组成	500U	500U×10
T4  DNA Ligase (5U/uL)	500U	500U×10
5×T4 DNA Ligation Buffer	400uL	400uL×10

酶储存缓冲液：
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ，50mM KCl，1mM DTT， 0.1mM EDTA，50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5)， 50mM MgCl₂，50mM DTT， 5mM ATP，连接促进剂。