产品名称：SrSpCas9-NLS蛋白

表达系统： E.coli 大肠杆菌 

蛋白分子量：175kDa

产品简介：

CRISPR/SrSpCas9来源于S. pyogenes菌株，是依赖于crRNA和tracrRNA(或连接后形成的sgRNA)引导的DNA内切核酸酶，在靶标双链DNA存在PAM(NGG)的情况下，特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成平末端。PAM对于Cas9的识别和剪切都是必需的，其剪切位点位于目标序列(target sequence)内，离PAM区3个碱基。本公司SpCas9在细胞内具有较高的基因组切割活性。NLS核定位信号，增加入核切割效率，适合真核细胞内靶基因的高效编辑。

产品组分：

保存条件：

-20℃储存1年；低温运输。

酶活定义：

在总体积为 20 μL 的1 × Reaction Buffer 反应体系中，100nM SpCas9-NLS核酸内切酶在37℃，15 min反应条件下能够消耗90%以上20nM 长度为100bp的靶标ssDNA或dsDNA （反应体系中crRNA含量100nM)。

实验流程：

1.顺式切割反应体系

推荐反应条件：37℃反应30-60min，85℃灭活5min。

不同长度 target DNA 需要的 Cas 酶和 sgRNA 的量需要根据 target DNA 的摩尔量计算，建议保持 Cas酶:sgRNA:target DNA 的摩尔比为 10:10:1，以尽量确保 target DNA 被剪切完全。

注意事项：

1.本产品仅供科研使用，使用前请仔细阅读本说明书。

2.本酶对热敏感，容易失活，应全程冰上配置反应体系，并在使用后立即将酶置于-20℃保存。

3.避免反复冻融。

4.为防止RNase 污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。