大肠杆菌O157抗原快速检测试剂（胶体金法）使用说明

Rapid Detection Kit for E.coli O157 (Colloidal Gold)

【原理和用途】

人类出血性肠炎主要是由O157血清型大肠杆菌感染引起，通过消化道传播，人若食用了被大肠杆菌O157污染的乳制品、肉制品、水果或蔬菜等，就可能患急性出血性肠炎。本试剂采用双抗体夹心法，将抗大肠杆菌O157特异性抗体包被在硝酸纤维素膜上，用于捕捉标本中的大肠杆菌O157抗原，然后用特异性抗体标记的免疫胶体金探针进行检测。

本试剂用于检测临床患者粪便标本和污染的食品中肠出血性大肠杆菌O157抗原，也可用于大肠杆菌O157纯培养的鉴定。

【操作步骤】

1、对不同来源的标本，制备样品检测液。

（1）纯培养细菌  挑取疑似大肠杆菌O157单个菌落，于小试管中制成0.3ml生理盐水菌悬液作为样品检测液。

（2）临床标本  取患者粪便标本少许，加1ml生理盐水充分振荡混均，离心或自然沉降后取上清0.3ml作为样品检测液。同时取粪便接种增菌培养液，37℃培养4～6小时，增菌后再次检测。

（3）污染物  取疑似大肠杆菌O157污染的食品少许，接种增菌培养液，37℃培养4～6小时，培养液即可作为检测液。

2、取试剂一个，撕开外包装，吸取上述样品检测液，滴加3～4滴（约0.2ml）于试剂园孔中，2分钟后开始观察结果，15分钟终止观察。

【结果判定】

阳性结果：试剂显示窗口“C”（对照）和“T”（检测）处出现2条红色沉淀线为大肠杆菌O157抗原检出阳性。

阴性结果：试剂显示窗口“C”处出现1条红色沉淀线为大肠杆菌O157抗原检出阴性。

试剂失效：试剂显示窗口“C”处未出现红色沉淀线，此情况下无论“T”处是否出现沉淀线，均判为试剂失效。

【注意事项】

1、本试剂可检出10⁷～10⁸CFU/ml大肠杆菌O157，为提高检出率，对于检测阴性的可疑样品可接种增菌液（如月桂基硫酸盐胰蛋白胨MUG肉汤）增菌4～6小时后再次检测。

2、标本中固相化杂质太多时最好离心取上清检测，否则会影响层析效果，出现非特异反应。

3、试剂取出后应立即使用，以保证试剂使用时干燥，因为试剂在空气中暴露时间过长后会受潮失效。

4、试剂用过后放入包装袋中，集中消毒后再处理，以防污染环境。

【规格】1人份/包装

【贮藏】室温避光保存，不得冻存。

【有效期】2年