PG114 PAGE凝胶快速制备试剂盒15%

¥318
雅酶
2021-06-16 22:28

上海雅酶生物科技有限公司

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上海雅酶生物科技有限公司
于洋
17321035826 021-34781650
info@epizyme.cn
产品属性
保质期一年
保存条件保存于4℃,其中 改良型AP溶液 保存于-20℃
规格125gel(0.75mm)
产品说明
PAGE凝胶快速制备试剂盒
PAGE Gel Fast Preparation Kit
本产品常温运输;保存于4其中改良型促凝剂保存于-20保质期12个月。

货号规格

货号可制胶数量
PG110(6%PAGE胶)
PG111(7.5%PAGE胶)
PG112(10%PAGE胶)
PG113(12.5%PAGE胶)
PG114(15%PAGE胶)
125(0.75mm胶)
or
>90(1.00 mm胶)
or
>60(1.50 mm胶)

产品内容
组分名称体积及数量
上层胶溶液(2×)80mL
彩色上层胶缓冲液(2×)80 mL
下层胶溶(2×)250mL
下层胶缓冲液(2×)250 mL
改良型促凝剂8mL
一次性配胶小杯50

产品特点
g
d快速制备凝胶——短时间即可灌制多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀释;
g
d彩色上层——可制备红蓝绿三种颜色的上层胶,为点样和区分不同凝胶提供最大便利;
g
d避免异味——无需使TEMED,避免恶臭气味;
g
d条带清——尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。

产品简介
good本产品采用上层胶和下层胶的预混配方,只需加入改良型促凝剂即可凝胶,简便快捷。所配的上层胶带有颜色(红色、蓝色或绿色),点样孔清晰易辨,方便点样。三种颜色设计,可用于区分含不同样品的凝胶。本试剂盒灌制的凝胶也可用于非变性PAGE凝胶电泳
good本产品配套提供改良型促凝剂,其具有更好的稳定性和催化效能,配胶过程中无需额外添加TEMED。为方便操作,已开盖使用中的改良型促凝剂可置于4℃保存至少三个月。


制胶流程(以一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例)
good1. 取等体积下层溶液下层胶缓冲液,各2.0/2.7/4.0 mL,混匀;
good2. 向步骤1的混合溶液中加入40/60/80μL改良型促凝剂,混匀;
good3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可(注意:此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许于配胶杯中,以判断胶凝固状况),加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上;
good4. 待下层胶凝固(约5~10 min),倒去上层水或醇
good4. 注意:当水(醇)和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固。
good5. 取等体积上层溶液彩色上层胶缓冲液0.5/0.75/1.0 mL,混匀;
good4. 注意:由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀。
good6. 向步骤5的混合溶液中加入10/15/20μL改良型促凝剂,混匀;
good7. 将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中,插入梳齿;
good8. 待上层胶凝固(约10~15 min),拔去梳齿即可用于电泳。
good6. 注意:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。

下层胶配方上层胶配方
凝 胶
厚 度
下层胶溶 液下层胶缓冲液改良型促凝剂凝 胶
厚 度
上层胶溶 液上层胶缓冲液改良型促凝剂
0.75 mm2.0 mL2.0 mL40μL0.75 mm0.5 mL0.5 mL10 μL
1.00 mm2.7 mL2.7 mL60μL1.00 mm0.75 mL0.75 mL15 μL
1.50 mm4.0 mL4.0 mL80μL1.50 mm1.0 mL1.0 mL20 μL

注意事项
good1. 本产品制备出的凝胶其上层胶对样品没有浓缩效应,与预制胶类似,但与传统PAGE胶相比,对蛋白条带分离效果更好,小分子量蛋白(比如10 kDa)也可以清晰地分离开,且蛋白条带更窄更锐利;
good2. 改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。加入较多量的促凝剂可加速凝胶,反之亦然;
good3. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量相反,如果室温较低可适当延长凝胶时间
good4. 本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED;
good5. 在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成;
good6. 推荐电泳条件为:150V,约50min(200 V,约35 min);
good7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good8. 本产品仅限科研使用。

凝胶浓度选择参考



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