VitaFast® Vitamin B1 (Thiamin) 简介
VitaFast® Vitamin 硫胺试剂盒简单易用,采用微生物方法,在微孔板种定量检测食品、药品和饲料中的硫胺总量(包括添加和原生硫胺)。所有所需的试剂均包含在试剂盒中。本试剂盒共能提供96次检测(包括标准品)。最后使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)进行读数。
样品处理:
液体样品:无菌过滤、稀释
固体样品:均质样品、提取(离心)、无菌过滤和稀释
含原生硫胺的样品处理:
固体样品:均质样品、酶处理、提取(离心)、无菌过滤和稀释
所需时间:试验过程…….. ………………………………约60分钟
评价时间……………. ………………………2分钟
孵育: 37 °C黑暗条件下24小时
标准品范围:0.012-0.060 mg / 100g(ml)
回收率: 90-105%
Intra-assay CV for standards: < 10 %
Inter-assay CV for standards: < 10 %
- 检测原理
VistaFast®硫胺微孔板检测试剂盒是利用微生物方法,用于定量检测食品、药品和饲料中的硫胺总量(包括添加和原生硫胺)。本微生物检测系统符合国际标准。
硫胺是从样品稀释提取所获得的。将稀释了的提取物和硫胺检测培养基加入包被有
乳酸杆菌(Laktobacillus fermentum ATCC Nr. 9338)的微孔中。则Laktobacillus fermentum的生长状况取决于硫胺的含量。添加V硫胺作为标准或者作为样品混合物,细菌会一直生长直至硫胺被消耗殆尽。孵育条件应为37 °C黑暗条件下孵育44-48小时。细菌生长时新陈代谢的强度和硫胺的含量形成关系并可以绘制称标准曲线,最后通过ELISA reader在610 - 630 nm (或者540 - 550 nm)读取结果。
2. 提供试剂每个试剂盒中包含足够进行96次试验的材料和标准品 每个试剂盒中包含:
1 × 96孔微孔板,包被有Laktobacillus fermentum (ATCC Nr. 9338)
3 × 无菌蒸馏水(30 ml) ,用于准备培养基、标准品和样品提取稀释液
3 × 硫胺培养基(固体)
3 × 硫胺氢氯化物标准品(固体)
3 × 粘性箔
1 × 微孔板固定器
3. 需要试剂但试剂盒种不提供 −无菌操作台
−黑暗条件下的培养箱,37 °C(98.6 °F)
−95 °C水浴,或者高压灭菌锅
−ELISA reader 610 - 630 nm (540 - 550 nm)
−pH 测量仪
−离心机,大约10000 ×g
−刻度移液枪20 - 200 µl; 100 - 1000 µl
−灭菌微量移液枪tips 20 - 200 µl and 100 - 1000 µl
−无菌试管1.5 - 2.0 ml
−移液枪5 or 10 ml
−带帽的无菌离心机管(15 and 50 ml)
−带无菌注射器的0.2 µm无菌滤膜
−双蒸水用于样品提取(available at ifp)
−0.1mol / l HCl
−2 mol / l NaOH (0.8 g 溶解于100 ml水中)
检测原生硫胺所需试剂 - 醋酸钠x 3 H2O-溶液2,5 mol / l
- Taka Diastase from Aspergillus oryzae (Fluka 86250)
- acid phosphatase from potatos (Fluka P 1146)
4.
用户须知 −检测培养基有可能刺激眼睛、皮肤和隔膜
−完成试验后须根据规章处理检测仪器(如使用高压灭菌锅)
5.贮藏条件 试剂盒应存放在2-8℃条件下
处理过的试剂(标准品、培养基)和硫胺缓冲液应马上使用,并在检测后丢弃。
将未使用的微孔板条放回原来的箔袋中,并与干燥剂一起重新封好,放在2-8℃温度下。微孔板须防止受潮或受到其他污染。
请勿在试剂盒标注的有效期之后使用。