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960化工网
上海西格生物科技有限公司
Protein A/G免疫沉淀磁珠试剂盒
Protein A/G免疫沉淀磁珠试剂盒
价 格:
¥800 - 3500
品 牌:
西格
产 地:
进口、国产
最新更新日期:
2021-06-16 22:57
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上海西格生物科技有限公司
我要认领
公司:
上海西格生物科技有限公司
联系人:
韩丽君
联系电话:
18930344717
021-57810052
联系邮箱:
2801747566@qq.com
QQ:
2801747566
产品属性
数量
28
英文名
Protein A/G Immunoprecipitation Kit
CAS号
详见说明书
保质期
详见说明书
供应商
上海西格
保存条件
低温冷藏
规格
20次/100次
产品说明
Protein A/G
免疫沉淀磁珠试剂盒
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
本产品仅供科研
6.
快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
中文名称:
Protein A/G
免疫沉淀磁珠试剂盒
英文名称:
Protein A/G Immunoprecipitation Kit
产品规格:
20
次
/100
次
发货周期:
1
~
3
天
产品简介:
Protein A/G Matrix
免疫沉淀磁珠及试剂盒系列产品是利用纳米表面技术使
Protein A/G
高密度定向包被到超顺磁性微球表面,与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相比,该产品具有更多的抗体结合位点,磁珠使用量更少,非特异性结合率低,可便捷高效地进行免疫沉淀实验。每毫升免疫沉淀磁珠结合
Human IgG
的能力可达到
300
μ
g
以上,单个沉淀反应仅需
25
μ
L
磁珠即可完成检测。微米级磁珠提供的超大比表面积,大幅缩短抗体与抗原吸附所需的平衡时间,
15 min
内即可完成抗体吸附过程,
30 min
内完成抗原沉淀操作。简短的操作时间避免长时间操作造成目标蛋白水解,保证了目标蛋白的活性及蛋白复合物的完整性。
免疫沉淀磁珠试剂盒配有经过优化预制的缓冲液,为免疫沉淀实验提供了佳的反应条件,增强了免疫沉淀实验的稳定性。
本产品可广泛应用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等样品中抗原的免疫沉淀反应。操作者可以参考本操作说明书,附表
1
的数据了解不同种属来源及亚型的抗体与
Protein A
磁珠、
Protein A/G
的结合能力。
储存条件:
2
~
8
℃保存
保存期:
1
年
注:磁珠结合
Human IgG
能力
(Antibody Capacity)
分别为:
Protein A
:
0.4
~
0.5 mg/mL; Protein A/G
:
0.5
~
0.6 mg/mL
操作流程:
1.
抗原样品制备:本操作说明书提供以下四种样品处理方法,建议您根据不同来源的抗原样品选择适当的方式进行预处理,使待检测抗原释放至样品溶液中。
血清样品处理:若目标蛋白丰度较高,建议用结合缓冲液
(
②
)
稀释血清样品至目标蛋白终浓度为
10
~
100
μ
g/mL
,置于冰上备用
(
或置于
-20
℃长期保存
)
。
悬浮细胞样品处理:离心收集细胞
(4
℃,
500 g
,
10 min)
,弃上清后称重,按每毫克细胞
50
μ
L
的比例用
1
×
PBS(
③
)
洗涤
2
次;按每毫克细胞
5
~
10
μ
L
的比例加入结合缓冲液
(
②
)
,同时加入蛋白酶抑制剂
(
如终浓度为
1 mM
的
PMSF)
,混匀后置于冰上处理
10 min
;离心收集上清液
(4
℃
,14000 g,10 min)
,置于冰上备用
(
或置于
-20
℃长期保存
)
。
贴壁细胞样品处理:移去培养基,按每
1.0
×
105
个细胞
150
μ
L
的比例用
1
×
PBS(
③
)
洗涤两次;用细胞刮棒刮脱细胞,收集至
1.5 mL EP
管内,按每
1.0
×
105
个细胞
20
~
30
μ
L
的比例加入结合缓冲液
(
②
)
,同时加入蛋白酶抑制剂
(
如终浓度为
1 mM
的
PMSF)
,混匀后置于冰上处理
10 min
;离心收集上清液
(4
℃,
14000 g
,
10 min)
,置于冰上备用
(
或置于
-20
℃长期保存
)
。
大肠杆菌样品处理:离心收集大肠杆菌
(4
℃,
12000 g
,
2 min)
,弃上清后称重,按每克
(
湿重
)
菌体
10 mL
的比例用
1
×
PBS(
③
)
洗涤
2
次;按每克
(
湿重
)
菌体
5
~
10 mL
的比例加入结合缓冲液
(
②
)
,同时加入蛋白酶抑制剂
(
如终浓度为
1 mM
的
PMSF)
,重悬菌体,超声裂解细胞,离心收集上清
(4
℃,
17000 g
,
10 min)
。
2.
磁珠预处理:将免疫沉淀磁珠
(
①
)
漩涡振荡
1 min
,使磁珠充分振荡重悬;取
25
~
50
μ
L
磁珠悬液置
于
1.5 mL EP
管中。加入
200
μ
L
结合缓冲液
(
②
)
洗涤,进行磁性分离[将
EP
管放置于磁性分离器
(
⑦
)
上,使磁珠被吸附在管壁至溶液澄清;该操作描述以下省略],弃上清液,从磁性分离器上取下
EP
管,重复洗涤一次。后加入
200
μ
L
结合缓冲液
(
②
)
重悬磁珠以备用。
3.
抗体结合反应:
抗体工作液的制备:用结合缓冲液
(
②
)
稀释抗体样品,配制成终浓度为
5
~
50
μ
g/mL
抗体工作液,置于冰上备用。
抗体吸附:将步骤
2
预处理的磁珠悬液进行磁性分离,弃上清液;加入
200
μ
L
抗体工作液,迅速重悬后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转
EP
管,
15 min
后进行磁性分离,收集上清液置于冰上以备后续检测。
洗涤:向
EP
管中加入
200
μ
L
结合缓冲液
(
②
)
洗涤,用移液器轻轻吹打使磁珠
-
抗体复合物均匀分散,然后进行磁性分离,弃上清液,从磁性分离器上取下
EP
管。重复以上洗涤操作一次。
4.
抗体交联反应
(
备选
)
:如操作者需要将抗体和目标抗原复合物共同洗脱,请忽略本步骤,进行步骤
5
。
本步骤适用于操作者需要单独洗脱目标抗原的试验,推荐使用
BS3(Thermo Scientific
,
Cat. #21580)
作为交联剂,相关实验请参照该试剂的操作说明。
5.
抗原沉淀反应
抗原吸附:加入
200
μ
L
步骤
1
中制备的抗原样品,用移液器轻轻吹打使抗原与磁珠
-
抗体复合物均匀分散。在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转
EP
管
10 min
,使抗原与抗体充分结合,如结合力较弱则可在室温下反应
1 h
或者在
4
℃下反应过夜。
洗涤与转移:将上述完成抗原吸附的磁珠
-
抗体
-
抗原复合物进行磁性分离,收集上清液置于冰上以备后续检测。向
EP
管中加入
200
μ
L
洗涤缓冲液
(
④
)
洗涤,用移液器轻轻吹打使磁珠
-
抗体
-
抗原复合物均匀分散,然后进行磁性分离,弃上清液;从磁性分离器上取下
EP
管,再重复洗涤两次。后加入
200
μ
L
洗涤缓冲液
(
④
)
,用移液器将磁珠
-
抗体
-
抗原复合物悬液转移至新的
1.5 mL EP
管中
*
,并执行磁性分离,移弃上清。
(*
注:抗原洗脱前务必将磁珠转移到新的
EP
管,避免将管壁上原有的非特异性吸附蛋白一起洗脱。
)
6.
抗原洗脱:本操作说明书提供以下两种抗原洗脱方案,操作者可根据后期检测的需要选择不同的抗原洗脱方法。
变性洗脱法:此法洗脱的样品适用于
SDS-PAGE
检测。从磁性分离器上取下
EP
管,向其中加入
25
μ
L 1
×
SDS-PAGE Loading Buffer(
自备
)
混合均匀,
95
℃加热
5 min
。然后执行磁性分离[也可以使用离心的方式
(
室温下
13000 g
,
10 min)
]收集上清液进行
SDS-PAGE
检测。
非变性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析。从磁性分离器上取下
EP
管,向其中加入
20
μ
L
洗脱缓冲液
(
⑤
)
混合均匀,室温孵育
10 min
。然后执行磁性分离[也可以使用离心的方式
(4
℃,
13000 g,10 min)
],收集上清液至新的
EP
管,并立即加入
1.0
μ
L
中和缓冲液
(
⑥
)
将洗脱产物
pH
调节至中性,用于后期功能分析。
注意事项:
1.
进行免疫沉淀操作之前,请务必认真阅读本操作说明书。
2.
本产品须与磁性分离器配套使用。
3.
磁珠使用前应充分振荡均匀。
Protein A/G
免疫沉淀磁珠试剂盒
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销的产品:
BEL-7404(
人肝癌细胞
) 5
×
106cells/
瓶×
2
脱水穿心莲内酯
(
标准品
)
质量规格:
HPLC
≥
98%
,标准品
Dehydroandrographolide
CTSC Others Human
人
CTSC / DPPI
人细胞裂解液
(
阳性对照
)
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯
(
标准品
)
质量规格:
HPLC
≥
99%
,标准品
Dehydroandrographolide succinate
中国仓鼠卵巢细胞
(
亚系克隆
);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1
脱水羊藿素
(
标准品
)
质量规格:
HPLC
≥
98%
,标准品
Anhydroicaritin
IL1R1 Others Mouse
小鼠
IL1R1 / CD121a
人细胞裂解液
(
阳性对照
)
脱氧野尻霉素
(
标准品
)
质量规格:
HPLC
≥
98%
,标准品
1-Deoxynojirimycin
Jurkat(
悬浮
)
急性
T
细胞白血病土大黄苷
(
标准品
)
质量规格:
HPLC
≥
98%,
标准品
Rhapontin
AXL Others Human
人
Axl Kinase
人细胞裂解液
(
阳性对照
) 9-(2-
羟乙基
)
腺嘌呤
9-(2-Hydroxyethyl)adenine
质量规格:美国进口
脐动脉平滑肌细胞
Many types of cells
包装:
5
×
105
方
(1ml)E-64d,
蛋白酶抑制剂
,
阿洛司他丁
E64d,E-64d
质量规格:
>98%,BR
EFNA1 Others Rat
大鼠
Ephrin-A1 / EFNA1
人细胞裂解液
(
阳性对照
) 2
’
-
脱氧胞苷
-5
‘
-1
酸二钠盐
dCMP,2Na
质量规格:
>98%
,
BR
大鼠输尿管上皮细胞完全培养基
100mLdAMP;2
’
-
脱氧腺苷
-5
‘
-
单
1
酸
2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate
质量规格:
>99%,BR
OKT 11
杂交瘤细胞抗
CD2 OKT 11 hybridoma cells against CD2 IMDM
培养基
(GIBCO)+20%FBS
黄素腺嘌呤二核苷酸二钠盐
FAD-Na2
质量规格:
BR,
罗氏进分
人脑血管周细胞裂解物
HBVCL
盐酸壮观霉素
sh
ē
ng hu
à
sh
ì
j
ì容量:
25
克
CD2 Others Cynomolgus
食蟹猴
CD2
人细胞裂解液
(
阳性对照
) 2-
溴芴
2-Bromofluorqnq 1133-80-8
人
T
细胞白血病细胞
;HuT 78
盐酸脲,英文名或英文缩写:
Semicarbazide xy7nochloride
,级别:实习级,
98%
,规格:
100
克
tTA
基因修饰的小鼠胰腺癌细胞
(B
类
);Pan02-CAG-tTA-3E6
木瓜蛋白酶
(
含
100mL
酶解缓冲液
) 10mLNADGN-
乙酰
-D-
基葡萄糖高级
WM35,
人色素瘤细胞
Human(
琼脂粉
-
细菌培养级
)
Protein A/G
免疫沉淀磁珠试剂盒
Bowes Melanoma
细胞,色素瘤细胞
人原髓细胞白血病细胞
,AL7P/HL-60R
细胞
人结直肠腺癌细胞
;HT-29DNAMarker
Ⅲ
25
克
A172(
人脑胶质瘤细胞
) 5
×
106cells/
瓶×
2D(+)-
密二糖
一水
》
99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7
IL8 Others Human
人
IL-8 (aa 1-77)
人细胞裂解液
(
阳性对照
) A.C.Eformide
毛细管电泳级甲先胺测序级
50ML1975-2-7Frozen
非洲绿猴肾细胞
;VERO75cm2
三角斜口细胞培养瓶
sh
ē
ng hu
à
sh
ì
j
ì容量:
25
克
BTK Others Human
人
Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase
杆状病毒
-
昆虫细胞裂解液
(
阳性对照
) Fibrinogen 250mg/1g/5g Sigma F8630
本产品仅供科研
培养细胞和冰冻切片:
准备工作:缓冲液的配备
3%柠檬酸——100ml 蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7·H2O)3g,pH2.0 左右。
2×SSC——1000ml 蒸馏水中加氯化钠 17.6g,柠檬酸三钠(C6H5O7Na3·2H2O,分子量 294)8.8g。
0.5×SSC——300ml 蒸馏水加 100ml 2×SSC 即可。
0.2×SSC——270ml 蒸馏水加 30ml 2×SSC 即可。
20%甘油——20ml 甘油加 80ml 蒸馏水即可。
0.5 M PBS——1000ml 蒸馏水加氯化钠 30g,Na2HPO4·12H2O 6g,NaH2PO4·2H2O 0.4g,PH7.2-7.6。
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Protein A/G磁珠;Protein A/G免疫沉淀磁珠;2μm,10mg/mL;蛋白A/G磁珠
2μm,10mg/mL;Protein G免疫沉淀磁珠;蛋白G磁珠;Protein G磁珠
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蛋白G免疫沉淀磁珠
Protein G磁珠
Protein G 磁珠
Protein A/G磁珠
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免疫沉淀试剂盒;磁珠法免疫沉淀试剂盒;Protein A+G
Protein A+G;免疫沉淀试剂盒;磁珠法免疫沉淀试剂盒
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