免疫组化
免疫学基本原理.通过标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分别进行组织和细胞原位检测，从而进行定位、定性及相对定量的研究。

实验意义
1.免疫组织化学可应用于恶性肿瘤的病理诊断和科研工作。2.可与组织化学染色方法的形态学诊断相结合, 提高疑难肿瘤的鉴别诊断的准确率.并为肿瘤进行进一步的病理分型。3.指导和提供临床治疗方案的选择。

实验步骤
1.石蜡切片免疫组化:①67°C烘箱烘片2小时,常规脱蜡至水.用pH 7.4的PBS冲洗三次。每次3 min ;②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min ,蒸馏水冲洗三次。PBS冲洗三次,每次3 min;③3%H202室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性, PBS冲洗三次，每次3 min ;④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭.室温孵育10 min ,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗。37*C孵育1-2 h或者4°C孵育过夜;⑤PBS冲洗三次,每次3 min ;滴加稀释至适当比例的带标记:二抗.379C孵育10~30 min , PBS冲洗三次,每次3 min ;⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液. 379C孵育10-30 min, PBS冲洗三次。每次3 min;⑦显色剂显色.自来水充分冲洗,复染细胞核,酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。2冰冻切片免疫组化:
①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片.厚度为5~6 μm ;
②载玻片可不打底,裱片后立刻用电吹风吹干;
③染色前需用冷*酮4°C固定10-20 min :
④PBS洗2次，每次5 min ; .
⑤3%H202灭活内源性过氧化物酶20 min ,需遍光处理;
⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似,最后脱水透明封片进行观察。
结果展示：



实验完成周期及交付标准：
1.实验周期; 1-2周
2.交付标准：
1、原始定性、定位结果图片；
2、详细实验报告，含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。
3、每个样品可提供（3张，200X光镜照片），具体照片倍数可根据客户要求而定

需确认的信息：
1.样本的种属?
2.样本类型
3.检测的目的蛋白
4.是否提供一抗（一抗如果公司抗体库里有该指标抗体，则可共享）
5.阳性率或者半定量分析要求
6.拍照要求

六、实验服务流程