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产品简介：
细胞凋亡（Apoptosis）是一种由基因控制的细胞自主死亡方式。它与组织器
官的发育，机体正常生理功能的维持，某些疾病的发生发展以及细胞癌变过程均有
着密切的关系。细胞凋亡已成为生命学科极为活跃的研究领域之一。此外，介绍几
种常用的细胞凋亡检测方式。在细胞凋亡的早期，细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸
（Phosphatidylserine，PS）将会从细胞膜内侧转移到细胞膜外侧，使PS 充分暴
露在细胞膜外表面。Annexin V 是一种磷脂结合蛋白，对PS 有高度的亲和力。因
此，Annexin V 作为一个敏感的探针可以有效地检测暴露在细胞膜表面的PS。目前
普遍使用的检测方法是将荧光标记后的Annexin V-FITC 作为探针，利用流式细胞
仪来检测细胞凋亡。
值得注意的是，在细胞坏死的过程中也会发生PS 的暴露。但两者的差别在于
细胞凋亡的初始阶段细胞膜结构是完好的，只有PS 转移，而细胞坏死则在早期阶
段细胞膜的完整性就破坏了，从而暴漏出PS。因此，检测细胞凋亡时，通常会使
用颜料碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）以确立细胞膜的完整性。PI 是一种核
酸染料，它可以染色死细胞，但不能进入完整的活细胞，从而将凋亡性细胞和坏死
性细胞区分开来。

操作步骤：
1、细胞收集与Annexin V-FITC 结合
（1） 在完成细胞凋亡诱导处理后，1500rpm，5 分钟离心后弃上清，收集
细胞。（贴壁细胞收集：先用PBS 洗涤贴壁细胞一次，再用胰酶消化
液解离细胞。1500rpm 离心5 分钟，弃上清收集细胞。）
（2） 用PBS 重新悬浮细胞，并计数。（如用含有EDTA 胰酶细胞消化液消
化细胞，建议将收集的细胞用PBS 再洗涤一次。）
（3） 取1～5×105 细胞悬浮液，1500rpm，5 分钟离心后弃上清，加入500ul
的1×Binding Buffer。（用蒸馏水1:9 稀释10×Binding Buffer）
（4） 加入5ul Annexin V-FITC，再加入10ul Propidium Iodide，轻轻混
匀。
（5） 在室温下，避光反应5～15min。
（6） 在1 小时内进行流式细胞仪或荧光显微镜检测。（如需更长时间保存，
细胞可先用1×Binding Buffer 洗涤后再用2%甲醛固定。）