蛋白电泳预制胶 Hepes-Tris gel

¥398
上海李记生物
2021-06-17 08:57

上海李记生物科技有限公司

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上海李记生物科技有限公司
苏经理
18201805506 021-50778506
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192073776
产品属性
保质期12个月
保存条件常温
规格10片/盒
产品说明
产品描述
李记生物的Hepes-Tris gel是利用自动化灌胶技术生产的一款非常安全、方便、高质量的预制聚
acrylamide凝胶,且兼容市场上主流的电泳槽,可直接用于PAGE电泳及Western blot检测,节省大量配胶时间,电泳时间,提高实验效率。

保存方法
常温下,可存放12个月;4~8℃下,可存放18个月;请勿置于0℃以下,以免凝胶发生冻裂。

订购信息

产品编号*浓度孔数最大上样量包装分离范围
AP15L9156%10孔60 μL10片/盒300~30 KDa
AP15L9176%15孔30 μL10片/盒300~30 KDa
AP15L9257.5%10孔60 μL10片/盒200~40 KDa
AP15L9277.5%15孔30 μL10片/盒200~40 KDa
AP15L9358%10孔60 μL10片/盒200~40 KDa
AP15L9378%15孔30 μL10片/盒200~40 KDa
AP15L94510%10孔60 μL10片/盒160~20 KDa
AP15L94710%15孔30 μL10片/盒160~20 KDa
AP15L95512%10孔60 μL10片/盒85~10 KDa
AP15L95712%15孔30 μL10片/盒85~10 KDa
AP15L96515%10孔60 μL10片/盒50~10 KDa
AP15L96715%15孔30 μL10片/盒50~10 KDa

*玻璃胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1 mm;凝胶尺寸为:宽×高×厚度为81×74×1.5 mm;浓缩胶:4%,1.5 cm。
*凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。
*均一胶可选浓度:6%、7.5%、8%、10%、12%、15%。
*梯度胶可选浓度:4~12%、4~15%、4~20%、8~16%、8~20%。也可以提供特殊浓度的定制服务。 


使用方法

1.将Hepes-Tris gel预制胶从包装袋中取出,固定在电泳槽中。
2.按照电泳仪要求加好内外槽电泳缓冲液,缓慢地将梳子拔出。
3.上样:将处理好的蛋白样品与loading buffer混合均匀,加热处理后上样。
4.电泳:恒压150 V, 40~50 min左右,溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
4.电泳结束,取出凝胶。用刀在一侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板。(请注意安全,使用带握柄的刀片)

注意事项
1.推荐使用李记生物专门配制的变性Hepes Running Buffer (Cat.#: AP14L106)或非变性Hepes Running Buffer (Cat.#: AP14L116)。电泳缓冲液不建议重复使用,因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果。
2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100V~120V, 适当延长电泳时间。
3.请参考下面的分离谱图选择合适浓度的预制胶,便于更好的蛋白电泳条带分离。
4.该预制胶可以兼容大部分电泳槽,例如Bio-Rad,北京六一,天能或其它胶板宽度在10 cm的电泳槽。

预制胶分离图谱



常见问题分析及解决方案

常见问题可能原因建议解决方法
高浓度条带样品同时出现在相邻泳道样品量多或加到相邻条带降低上样量,如有溢出,使用缓冲液冲洗上样孔。
上样孔破损移除制孔梳时加倍小心,如上样孔破损,换用新凝胶。
凝胶干缩打开包装后,尽快进行电泳。
可将凝胶在电泳缓冲液中浸泡一段时间,待凝胶恢复形状后上样。
蛋白分离效果不佳样品含盐量过高使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。
提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲液降温等改善效果。
电泳时溴酚蓝带扭曲
电泳时间大幅度延长
内槽缓冲液泄露重新夹一下胶板,防止在电泳过程中内槽液面逐步降低。
上样孔中有气泡或残留凝胶保存缓冲液上样前,用移液枪吸取缓冲液轻轻冲洗上样孔,将气泡吹走。
样品蛋白浓度过高使用上样缓冲液稀释蛋白样品
凝胶安装不当,内槽漏液检查内槽密封条,垫片等附件是否安装恰当。
电压设置有误,或电泳缓冲液使用不当确认凝胶安装位置,重新安装凝胶。
严格按照本说明书提供配方配置电泳缓冲液。
电泳后条带模糊、变黄电泳缓冲液PH使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。
凝胶浓度选择不当根据凝胶最佳分离范围选用不同浓度凝胶。对于小分子蛋白的分离,请选用较高分离胶浓度的预制胶产品。
蛋白量超出凝胶分离能力提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲液进行降温。
电泳时泳道拖尾严重
点样孔样品滞留明显
样品裂解处理不充分裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度,
或增加裂解液的比例,使样品充分裂解。
Loading buffer处理不充分。Loading buffer处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后,再进行loading buffer 处理。
样品中含有较大颗粒杂志如细胞碎片、菌体碎片。高速离心后,取上清液电泳。
电泳带呈微笑状(中间凹陷,两边突起)样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高稀释样品或对样品进行透析后,再进行loading buffer处理和上样。