| 常见问题 | 可能原因 | 建议解决方法 |
| 高浓度条带样品同时出现在相邻泳道 | 样品量多或加到相邻条带 | 降低上样量,如有溢出,使用缓冲液冲洗上样孔。 |
| 上样孔破损 | 移除制孔梳时加倍小心,如上样孔破损,换用新凝胶。 |
| 凝胶干缩 | 打开包装后,尽快进行电泳。 |
| 可将凝胶在电泳缓冲液中浸泡一段时间,待凝胶恢复形状后上样。 |
| 蛋白分离效果不佳 | 样品含盐量过高 | 使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。 |
| 提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲液降温等改善效果。 |
电泳时溴酚蓝带扭曲 电泳时间大幅度延长 | 内槽缓冲液泄露 | 重新夹一下胶板,防止在电泳过程中内槽液面逐步降低。 |
| 上样孔中有气泡或残留凝胶保存缓冲液 | 上样前,用移液枪吸取缓冲液轻轻冲洗上样孔,将气泡吹走。 |
| 样品蛋白浓度过高 | 使用上样缓冲液稀释蛋白样品 |
| 凝胶安装不当,内槽漏液 | 检查内槽密封条,垫片等附件是否安装恰当。 |
| 电压设置有误,或电泳缓冲液使用不当 | 确认凝胶安装位置,重新安装凝胶。 严格按照本说明书提供配方配置电泳缓冲液。 |
| 电泳后条带模糊、变黄 | 电泳缓冲液PH | 使用透析、超滤,或稀释等方法降低盐浓度。 |
| 凝胶浓度选择不当 | 根据凝胶最佳分离范围选用不同浓度凝胶。对于小分子蛋白的分离,请选用较高分离胶浓度的预制胶产品。 |
| 蛋白量超出凝胶分离能力 | 提高电泳缓冲液用量,或使用冰袋对缓冲液进行降温。 |
电泳时泳道拖尾严重 点样孔样品滞留明显 | 样品裂解处理不充分 | 裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度, 或增加裂解液的比例,使样品充分裂解。 |
| Loading buffer处理不充分。 | Loading buffer处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后,再进行loading buffer 处理。 |
| 样品中含有较大颗粒杂志如细胞碎片、菌体碎片。 | 高速离心后,取上清液电泳。 |
| 电泳带呈微笑状(中间凹陷,两边突起) | 样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高 | 稀释样品或对样品进行透析后,再进行loading buffer处理和上样。 |