【实时荧光定量PCR】QPCR

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2021-06-17 09:19

广州永诺生物科技有限公司

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林惠芳
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lhf@forevergen.cn
产品说明
核酸的半保留复制是生物体生长发育、遗传传代的生物学基础。试验证明,高温可以使 DNA发生变性解链,当温度降低后又可以复性成双链。因此,通过体外控制温度的高低变换, 就可控制 DNA的变性和复性。经典 PCR技术就是基于上述原理,在体外条件下,通过变性—退火—延伸的反复循环,以 dNTP为反应原料 ,使得模板DNA在引物、热稳定性 Taq聚合酶和适当离子存在的条件下进行快速而大量的扩增。
实时定量 PCR( Real - Time Quantitative Polymerase ChainReaction,RTQ— PCR) 是在经典 PCR技术基础上,通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用特定仪器检测荧光信号积累的强弱,进而实时监测每一轮PCR反应产物,并对与其产物量呈正相关的初始模板进行定量分析的技术。
实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两种,探针类是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类则是利用荧光染料或者特殊设计的引物来指示扩增的增加。前者由于增加了探针的识别步骤,特异性更高,但后者则简便易行。该技术不仅实现了对 DNA/RNA模板的定量,而且具有灵敏度和特异性高、能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点,目前已广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。

应用范围
实时定量 PCR技术具有特异性强、成本低、使用方便、无EB污染等优点, 目前被广泛应用于基因表达差异分析、病原检测等方面。
1 基因表达水平的定量分析
以生物体组织、特定发育时期mRNA为参数, 采用实时定量PCR技术对特定目标基因的表达情况进行测定分析。
2 病原体检测
检测生物体或特定材料中细菌、病毒、衣原体、支原体、寄生虫等许多病原体的数量差异。
3 基因突变及多态性的分析
对已知DNA序列的突变位置、序列多态性进行定位分析。
4 转基因产品的安全性检测
利用高敏感的PCR反应产物,对转基因植物、食品、疫苗中可能介入的外源物质进行检测,评估其风险程度

送样要求 
标本尽可能新鲜;细胞数为106以上,动物组织为50 mg以上。 
组织:离体时间尽量不超过15分钟,放入冻存管中,先放入液氮中速冻几个小时或者过夜,再放入-80度冰箱或液氮保存。 
异地不能收取样本时,请采用快递方式,样本放置在干冰中快递。

客户提供信息 
检测基因的名称、种属、变体,尽量提供genebank号。 
检测何种属样品,样品类型(组织、细胞、血液),样品是否经过抽提反转录。 
检测样品数量。

提供结果
原始数据 
实验报告 
SCI标准作图 (附实验报告)

实例结果
【以上实例结果均为永诺生物自主实验整理所得,请勿随意盗用,更多资讯欢迎致电020-84298069】