真核细胞siRNA转染试剂,miRNA转染试剂HiPerFect Transfection Reagent

¥1810
qiagen
德国
2021-06-17 11:15

上海研卉生物科技有限公司

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上海研卉生物科技有限公司
李先生
18702156455 021-69000211
yanhuibio@163.com
产品属性
英文名HiPerFect Transfection Reagent
数量4
供应商研卉生物
规格0.5ml
产品说明
真核细胞siRNA试剂,miRNA转染试剂HiPerFect Transfection Reagent 301704
真核细胞的siRNA和miRNA转染
  • 低浓度条件下的siRNA高效转染
  • 高效转染原代细胞,细胞存活率高
  • 高效转染悬浮细胞和巨噬细胞
  • TransFect Protocol Database中有针对特殊细胞类型的实验方案
  • 高效转染miRNA模拟物或抑制剂
HiPerFect Transfection Reagent是一种阳离子和中性脂组成的独特混合物,能够有效摄入siRNA和有效释放细胞内部的siRNA,即使使用低浓度的siRNA也可高效敲除 基因。除了siRNA,HiPerFect Transfection Reagent还适用于低通量和高通量的转染miRNA模拟物或抑制剂。TransFect Protocol Database中有适用于特殊细胞类型的实验方案。
HiPerFect Reagent能够高效敲除CDC2。
使用QIAGEN的HiPerFect Transfection Reagent或者其他供应商的Reagent L,将不同浓度的靶向CDC2的siRNA转染至HeLa S3细胞内。同时转染靶向绿色荧光蛋白(GFP)的非沉默siRNA。48小时后,采用定量real-time RT-PCR评估CDC2的敲除水平。利用GAPDH的表达量对CDC2的表达进行标准化。其相对于未转染的对照细胞的表达水平如图所示。
性能

各种悬浮细胞系以及分化和未分化的巨噬细胞已进行过检测,通过使用HiPerFect Reagent进行siRNA转染检测。许多细胞系可成功转染,并有效敲减靶基因表达(见表1)。使用HiPerFect Reagent转染对于一些需电穿孔转染的细胞类型来说是最佳选择。

表1.使用HiPerFect Reagent成功转染的细胞系
细胞系细胞类型siRNA的浓度敲减
K562人慢性髓性白血病5 nM85%
Jurkat人T细胞75 nM83%
D1.1人T细胞50 nM84%
RAW 264.7小鼠巨噬细胞25 nM77%
J774.A1小鼠巨噬细胞50 nM97%
PMA-differentiated THP-1人急性单核细胞白血病5 nM82%
MEL鼠红白血病5-20 nM50-70%

HiPerFect Reagent不适合转染的细胞系(见表2)。

表2.HiPerFect Reagent不适合转染的细胞系
细胞系细胞类型
Raji人B细胞
U937人巨噬细胞
Molt4人T细胞
Molt14人T细胞
HL60早幼粒细胞系
E6.1人T细胞
原理

siRNA转染可能发生脱靶效应,即siRNAs影响非同源或部分同源靶基因的表达,但在很大程度上可通过使用低浓度的siRNA避免。使用 HiPerFect Transfection Reagent,可高效的转染和沉默基因,在某些情况下可使用10 pM siRNA。使用HiPerFect Transfection Reagent可在很宽的siRNA浓度范围内高效转染siRNA,可使研究者选择他们所需的siRNA浓度。可用于转染多种类型的细胞,包 括:HeLa、HeLa S3、HEK 293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF。

miRNA研究

micro RNAs(miRNAs)是一类内源性小分子RNA,与siRNAs特点相同。miRNAs在多种生物过程中有重要作用,如生长、分化和调亡。转染合成的 miRNA模拟物和抑制剂,是一种用于解释特定miRNAs的靶标和作用的技术。miRNA模拟物是一种化学合成的miRNAs,模拟转染细胞的自然产生 的miRNAs。miRNA抑制剂是一种单链修饰RNAs,能够特异性抑制miRNA的功能。转染miRNA模拟物抑制基因的表达,或转染miRNA抑制 剂增强基因的表达,由此证明目的miRNA调节该基因的表达。而且,miRNAs在各种信号通路中的作用也可通过检查转染miRNA模拟物或抑制剂后特异 性的基因表型来确定。筛查实验也可通过检查转染大分子量miRNA模拟物或混合物后的基因表型来进行。HiPerFect Transfection Reagent用于真核细胞siRNA的高效转染,也可用于miRNA模拟物或抑制剂的低通量或高通量转染。

HiPerFect Transfection Reagent (0.5 ml)
HiPerFect Transfection Reagent for up to 166 transfections in 24-well plates or up to 666 transfections in 96-well plates
301704
1810
HiPerFect Transfection Reagent (1 ml)
HiPerFect Transfection Reagent for up to 333 transfections in 24-well plates or up to 1333 transfections in 96-well plates
301705
3210
HiPerFect Transfection Reagent (4x1 ml)
HiPerFect Transfection Reagent for up to 1332 transfections in 24-well plates or up to 5333 transfections in 96-well plates
301707