金斯瑞Ni-IDA亲和层析介质是把IDA(亚氨基二乙酸)共价偶联到4 %交联的琼脂糖介质上,再通过IDA的3个结合位点螯合Ni2+制备而成,可以纯化通过包括细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等蛋白表达系统表达的、含有6xHis标签的重组蛋白。该纯化介质用来纯化天然条件下的His标签蛋白,结合在介质上的蛋白用咪唑缓冲液洗脱下来。金斯瑞Ni-IDA亲和层析介质的Ni2+脱落程度很低,并具有高吸附量及高稳定性,在多聚His标签的重组蛋白的纯化实验中有非常好的表现力,具体特性见表1。
柱体积 | 10 ml |
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动态吸附量 | 20 mg 6×His 标签蛋白(27 kD)/ml介质 |
球形基质 | 4 %交联度琼脂糖 |
平均粒径 | 90 μm (45-165 μm) |
储存溶剂 | 1× PBS(含20%乙醇) |
储存&稳定性 | 2-8 ℃储存18个月 |
下图为金斯瑞和X公司Ni-IDA亲和层析介质的比较
图1. 分别使用金斯瑞和X公司的Ni-IDA亲和层析介质纯化含His标签的30 kD可溶性重组蛋白样品,该蛋白样品来自于E.coli细胞裂解液。
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