miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销

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百奥莱博
北京
2021-06-17 11:17

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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512757892
产品属性
数量760
英文名miRNA isolation Kit(precipitation method)
保质期一年
供应商北京百奥莱博科技有限公司
保存条件常温运输,4℃
产品说明

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


名称:miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销
规格:50次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
microRNA(miRNA)和RNA干扰研究是当今分子生物学研究的一大热点,但快速分离和纯化相关的小RNA十分棘手,是目前研究 miRNA的主要技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几,并且基本采用先提总 RNA 再富集其中的小RNA的两步法策略,国内相关产品更是一片空白。百奥莱博为满足广大用户的需求,开发了具有自主知识产权的本产品。

试剂盒特点:
1.从总 RNA中直接分离纯化小RNA,不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA 长度大部分在 200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 操作简单快速,整个过程只需要约30分钟。
3.小RNA 纯净,OD260/280一般都在 1.9以上。
4.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA,但会有少量残留大 RNA,如果需要纯度更高,可以选择 PAGE 回收法。

试剂盒组成:

成分规格
溶液A5ml
溶液B10ml
溶液C50ml
RNase-free 水10ml
说明书1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在纯化好的100μl 总 RNA(含大 RNA和小RNA)中,加入50μl溶液A,振荡 30秒混匀。如果 RNA样品体积不足 100μl,可以用RNase-free水补足,如果体积超过 100μl,可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到 100μl。
2.室温 12000~15000g离心 30分钟。小RNA在上清中,大 RNA在沉淀中。
 注意:离心时间不能短于30分钟,否则大 RNA沉淀不充分。
3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA电泳对照用。
4.在上清液中加入200μl溶液B,振荡 30秒混匀。
5.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂,所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。
6. 加入1mL溶液C,震荡数秒。
7.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。
8. 短暂离心数秒,小心吸弃残留液体(约50μL左右)。
9.在沉淀中(含小RNA)加入30-100μl RNase-free 水,吹打溶解即得小RNA溶液。注意:不能只吹打管底部分,还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分,因为上面也有有小RNA沉淀。
10. 最好先 PAGE-银染检测小RNA 纯度再使用。
miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销
更多有关miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)北京现货促销的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:

·*酚蓝溶液(电泳级)
编号:BTN100882
英文名称:Bromophenol Blue Solution
规格:10mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S,分子量为669.97,CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液,溶于甲醇、乙醇和*酚,是一种pH指示剂,在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围,颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液,用作制备常用做电泳指示染料,其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中,相当于300bp dsDNA,在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄,则表示样品中酸性物质没去除干净,必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色,否则蛋白将向相反方向移动。

储存条件:常温运输及避光干燥保存,有效期一年。

·冷启动核酸酶
编号:BTN130824
英文名称:Cold-active Nuclease
规格:10000U
本酶能够切断所有类型的DNA和RNA(单链、双链、线性以及环状),即使在冰上也能进行反应。因此,本酶特别适用于消化蛋白质等一些热不稳定基质中的核酸物质。

产品用途:
➤ 降解基因组DNA。
➤从大肠杆菌细胞中抽提蛋白质时,降低溶液黏度。
➤ 双向电泳时,对样品进行预处理。
➤ 病毒纯化时的预处理。

产品组成:
成分规格
Cryonase冷启动核酸酶(20U/μl)500μL
使用手册1份


储存条件:低温运输,4℃遮光保存,有效期二年。

活性定义:以鲑鱼精子DNA为底物,在37℃、pH7.5的条件下,1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需的酶量定义为1个活性单位(U)。


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·25mM*化*溶液(PCR级MgCl2溶液)
编号:BTN90302
英文名称:MgCl2,PCR Grade
规格:5mL
本产品为专门用于PCR的MgCl2,其浓度为25mM,可以用于调节MgCl2的最佳浓度。

储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

·真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂
编号:BTN130529
英文名称:Protease Inhibitor for Yeast
规格:1mL
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液,溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止蛋白质降解。

产品特点:
1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广,能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。

储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。

·大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
编号:BTN140378
英文名称:E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
规格:10*100μl
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,*霉素,链霉素,壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为:F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。


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