Sirius Red Staining Kit 

天狼星红染色试剂盒

结缔组织从狭义上讲主要由三类纤维成分构成：胶原纤维、网状纤维和弹性纤维。其中，胶原纤维 (Collagen Fiber) 是分布最广、含量最丰富的一类纤维成分，在维持组织结构和机械强度方面发挥着重要作用。

天狼星红 (Sirius Red) 是一种强酸性阴离子染料，在酸性条件 (pH 2-3) 下可与胶原蛋白中的碱性氨基酸残基结合，从而特异性标记胶原纤维并呈红色。在偏振光显微镜下，不同类型胶原纤维因分子排列差异可产生各向异性双折射现象，其中 I 型胶原纤维呈橙黄色或亮红色，III 型胶原纤维呈绿色，能够显示胶原纤维的分布，还可在一定程度上实现不同胶原亚型的可视化区分。

虽然采用免疫组织化学方法也可以检测 I 型和 III 型胶原纤维，但相关抗体价格较高且实验操作相对复杂、耗时较长。相比之下，天狼星红染色方法具有成本低、操作简便、重复性好等优势，因此在组织学和病理学研究中得到广泛应用。

MCE 天狼星红染色试剂盒由苏木素染色液和天狼星红染色液组成，主要用于观察各种组织病变过程中胶原纤维的异常沉积或纤维增生。在普通光学显微镜下，心脏、血管等组织中的胶原纤维可被染成红色；而在偏振光显微镜下，该方法有助于对不同类型纤维化病变进行分型及程度评估。

苏木素染色液：RT，1 年。避光保存

天狼星红染色液：4°C，1 年。避光保存

试剂准备

1. 固定液：10% 福尔马林

2. 其他试剂：二甲苯、中性树胶或封片剂、梯度乙醇、蒸馏水等

3. 设备：普通光学显微镜或偏振光显微镜

操作步骤

注：正式染色操作前建议先进行预实验，以确定组织切片的最佳染色条件。

1. 样本固定与包埋：组织经 10% 福尔马林固定液固定后，进行常规脱水、石蜡包埋处理。

2. 切片脱蜡与水化：将组织切片切至 3-8 μm 厚度，按常规方法脱蜡至水化备用。

3. 苏木素染色：将切片用苏木素染色液滴染 3-10 min，随后轻轻水洗 30-120 s。

4. 天狼星红染色液：将切片用天狼星红染色液滴染 10-60 min。较易上色的组织可染色 10-20 min。

5. 水洗：将切片用流水稍作冲洗，去除表面的染色液。

6. 脱水处理：用 95% 乙醇快速脱水，随后用无水乙醇脱水 3 次，每次 5-10 s。

7. 透明与封片：经二甲苯脱蜡透明处理后，使用中性树胶或封片剂封片，在显微镜下进行观察并可进行图像采集与分析。

染色结果判读

普通光学显微镜

1. 胶原纤维：呈红色。

2. 肌纤维和血细胞：呈黄色。

3. 细胞核：呈蓝褐色至黑色。

偏振光显微镜

1. I 型胶原纤维：呈强橙色或亮红色。

2. III 型肌纤维：呈绿色。

1. 本染色液可采用滴染法或浸染法进行染色；若切片数量较少，建议使用滴染法。

2. 为使在偏振光镜下显示清晰，建议针对偏振光检测切片厚度为 6-7 μm。

3. 若不进行苏木素染色，细胞核着浅红色，胶原纤维和肌纤维的对比更明显。

4. 天狼星红染色后不宜在低浓度乙醇中长时间处理，否则肌纤维的黄色易脱色。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。